课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数评课稿

科目：生物

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专题2 课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

第

课时

课题名称

进行微生物数量的测定

学习目标

重点

难点

主备人

韩静

结合实验设计，分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决措施，学会微生物技术方法，并对培养结果经行分析和评价。

利用选择培养基分离细菌

运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数问题

自

主

学

习

基础知识梳理

1.

统计菌落数目

（1）方法：

（2）统计依据：当样品的

足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个

。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（3）操作：

①设置

，增强实验的

与

②为保证结果准确，一般选择菌落数在

的平板进行计数。

③统计的菌落数往往比活菌实际数目

（4）计算公式：每克样品中的菌株数=

，其中C代表某一稀释度下平板上生长的

，V代表涂布平板时所用的

，M代表

2.设置对照

（1）对照试验：是指除了

（2）主要目的：排除实验组中

对实验结果的影响，提高实验可信度。

3.实验操作流程

（1）土壤取样

①取样原因：

②土壤要求：富含

，PH接近

且潮湿。

③取样部位：距地表约的

土壤层。

（2）样品稀释

①稀释原因：样品的

直接影响平板上生长的

②稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在

之间，便于计数。

（3）微生物的培养与观察

①培养：根据不同微生物的需求，控制适宜的

和

②观察：a.观察方法：每隔

统计一次菌落数目，最后选取菌落数目

时的记录作为结果。

b.菌落的特征：包括菌落

，

，

和

等。

（4）菌种鉴定：①原理：细菌合成的

将尿素分解成氨，使培养基的

增强。

②方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入

指示剂，培养某种细菌后，若指示剂变

，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

4.操作提示：（1）无菌操作：①取土样的用具在使用前都需要

②实验操作均在

进行。

（2）做好标记：本实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，使用前应标明培养基的

、

以及平板上培养样品的

等。

（3）制定计划：对于耗时较长的实验，要事先制定计划，以便提高

问题探究：

1.试写出分离土壤中分解尿素的细菌的实验流程

精

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2017－2018第一学期

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讲

互

动

2.

统计菌落数目

甲，乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为10的培养基中，得到以下两种统计结果。

（1）甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否真实可靠？为什么？

（2）乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去。然后取平均值。该同学对实验结果的处理是否合理？为什么？

（3）某同学在三种稀释度下吸取0.1ml的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1g样品的活菌数。

（4）为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？

3.

分析教材P22“设置对照”中的实例,探讨下列问题: (1)在A同学确定自己操作无误的情况下,A同学得出的B菌落数多于其他同学的原因可能有哪两种?

(2)如何设计对照实验帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素?

4.微生物数量测定的实验设计

(1)为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?

(2)本实验中应如何统计培养基上生长的菌落数?

(3)实验中的无菌操作主要有哪些?

稀释度

10

10

10

6546平板1 320 212 21 平板2 360 234 23 平板3 356 287 18 循化高级中学

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