复习与测试优秀教学设计说课稿

专题二基础巩固过关测试

1、培养基：⑴

概念：人们按照微生物对_________________的不同需求，配制出供其________ ________的营养基质。

⑵

营养组成：一般都含有_________、_________、__________和____________。此外，还需要满足微生物生长对________（培养霉菌时需调至________，培养细菌时需调至_______或___________）、_________以及________________________（微生物生长不可或缺的_______ _______________）的要求。

(3)分类：按物理性质分为__________________（不含凝固剂）和_____________________（含凝固剂，实验室最常用的凝固剂是___________）；按用途分为_____________________（允许_______________的微生物生长，__________或__________其他种类的微生物生长的培养基）和___________________（根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品的培养基）

2、无菌技术的意义：获得纯净培养物的关键是防止______________________________，还能有效避免________________________________。具体来说，对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和__________；对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行__________；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________________附近进行。

3、常用的消毒法有：①__________________：100℃，5⁓6min；②___________________：适用于不耐高温的液体，如牛奶，70⁓75℃，30min或80℃，15min；③使用_______________进行消毒：如___________擦拭双手，用__________消毒水源等；④还可用____________照射对接种室、接种箱或工作台进行消毒。

4、常用的灭菌法有：①_________________：适用于接种工具或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的_______________________，以迅速彻底地灭菌；②________________：适用于耐高温、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属用具，放入___________________内，在____ _________℃加热_____________；③________________________：适用于培养基及其容器，放入盛有适量水的_______________________内，一般在压力为_____________，温度为_________℃，维持_________________。

5、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：

⑴

计算：依据_______________，计算配制一定体积的培养基时，各种成分的用量。

⑵

称量：牛肉膏要放在______________上称量，牛肉膏和蛋白胨都易__________，称取时动作要迅速，称取后及时盖上瓶盖。

⑶

溶化：_____________连同称量纸一同放入烧杯→加入少量水，加热→溶化后取出称量纸→加入称量好的______________和氯化钠，搅拌→加入___________，加热使其溶化，并不断搅拌→补加____________定容。溶化后灭菌前还应该______________________。

⑷

灭菌：特别注意灭菌前要_________________；方法为___________________________。

⑸

倒平板：待培养基冷却至________℃左右（即不烫手）时，在________________附近进行倒平板。上图倒平板操作的正确步骤是_______________。操作时要使锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是_______________________________________________________。平板冷凝后要

将平板倒置的原因是______________________________________________________。

6、微生物接种（纯化）的方法：

主要方法

平板示意图

原理

通过____________在固体培养基表面________________的操作

将菌液进行_________________________，然后将不同_____________的菌液分别_________到固体培养基的表面

①__________________法

②_________________________法

结果

聚集在一起的微生物将被分离（分散）成_________细胞，经培养后在培养基表面繁殖形成__________菌落

7、方法①的注意事项：⑴

几次灼烧接种环的目的是：

a. 第一步（取菌种）前灼烧：杀死接种环上____________的微生物。

b. 每次划线前灼烧：杀死__________________结束后，接种环上__________的菌种，使下次划线的菌种直接来源于_________________________，从而通过划线次数的__________，使每次划线菌种数目逐渐__________。

c. 接种结束后灼烧：杀死接种环上____________的菌种，避免细菌__________________或___________________________。

⑵

第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线的__________开始，是因为划线后线条_____ ____的细菌数目比__________少，能使细菌的数目随着划线次数的__________而逐渐___________，最终得到由__________细菌繁殖而来的菌落。

⑶

灼烧接种环，待其__________后才能伸入菌液；划线时最后一区不要与第一区_________；划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基__________。

8、方法②的注意事项：⑴

活菌计数法，即_______________________法：

a. 原理是当样品的___________足够高时，培养基表面生长的________________，来源于样品稀释液中的_______________，通过统计平板上的_________数，就能推测出样品中大约含有多少__________。计算公式：_______________________

b. 为了保证结果准确，一般选择菌落数在____________的平板进行计数；同时要涂布至少3个平板作为____________，增强实验的准确性；而且其结果应基本___________，否则应重新实验。

c. 该方法的缺点是统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏_______。是因为当________或________细胞_______________时，平板上观察到的只是_________________。

⑵ _____________________法也是测定微生物数量的常用方法，利用____________________进行估算，统计值往往比实际值偏______，是因为显微镜下___________________________。

9、菌种的保藏方法有：①___________________，适用于_________________的菌种，先接种到试管的_______________培养基上培养，然后放入______℃的冰箱中保藏；②_________ ____________，适用于需要_________________的菌种，先将菌液转入灭菌后的_________中，混匀后放在_______℃冷冻箱中保存。

10、尿素是一种重要的农业_________，只有当土壤中的细菌将尿素分解成_______之后才能被

植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成__________。

11、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于_____________生长的条件（包括________、_________、_______等），同时_________或__________其他微生物的生长。比如：

a. 培养基中加入青霉素时可抑制___________的生长，从而分离得到____________。

b. 培养基中缺乏氮源时，可分离出_________________，因为其可以空气中的________为氮源；培养基中若缺乏有机碳源时，可分离出________________，因为其可利用空气中的__________制造有机物生存。

c. 当尿素是________________时，可__________不能利用尿素的微生物生长，使能够利用尿素的微生物生长，从而分离出能分解尿素的微生物。

d. 在_________环境中可分离耐盐菌，其他菌因易__________而不能生存；在__________环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物因________失活而无法生存。

12、微生物种类的鉴别：⑴

可根据微生物的菌落特征做初步判断，如菌落的__________、_________、_____________、__________等方面。

⑵

利用鉴别培养基做判断，比如：a. 分解尿素的细菌的鉴别：培养基中加入_________指示剂，呈现________。原理：细菌合成的__________将尿素分解成_______，使pH________。b. 大肠杆菌的鉴别：方法为____________，过滤后将其放在_________________培养基上，菌落呈现出__________。

13、结合对照，分析培养物中是否有杂菌污染时，实验组设置为_________________________，对照组设置为___________________________；分析选择培养基是否筛选出一些菌落时，实验组设置为_________________________，对照组设置为___________________________。

14、纤维素酶是一种________酶，至少包括_________、_________和_________________三种组分。前两种酶使纤维素分解成_______________，第三种酶再将其分解成______________。

15、纤维素分解菌的筛选方法为_____________________。筛选原理：该物质能与纤维素等多糖类物质形成________________，但不与____________和___________发生反应，因此，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基中会出现以_______________为中心的_____________。

16、筛选纤维素分解菌的实验流程及注意事项：

⑴

土壤取样：富含____________的环境。

⑵

选择培养：通过选择培养以增加纤维素分解菌的__________，因此应该用_________培养基（物理性质类型）；该培养基以纤维素粉为________________，起到筛选作用。

⑶

梯度稀释：制备系列稀释液，目的是使纤维素分解菌的细胞分散开，以获得单个的菌落。

⑷

涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，该鉴别培养基即需要加入____________。加入方法有两种：a. 先培养微生物，再加入该溶液进行颜色反应，该操作的缺点是操作繁琐，加入溶液会使____________________________；b.______________时加入该溶液，该操作的缺点是能够分解__________的微生物和具有降解__________能力的微生物，在培养过程中也会形成的_____________，与纤维素分解菌不易区分。

⑸

挑选产生____________的菌落。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产_______ ________的实验，其含量一般是采用分解纤维素后所产生的____________进行定量的测定。

答案

1、⑴营养物质

生长繁殖

⑵水

碳源

氮源

无机盐

pH

酸性

中性

微碱性

氧气

特殊营养物质（生长因子）

微量有机物

⑶液体培养基

固体培养基

琼脂

选择培养基

特定种类

抑制

阻止

鉴别培养基

2、外来杂菌的入侵

操作者自身被微生物感染

消毒

灭菌

酒精灯火焰

3、①煮沸消毒法

②巴氏消毒法

③化学药剂

酒精

氯气

④紫外线

4、①灼烧灭菌 充分燃烧层（外焰）灼烧 ②干热灭菌 干热灭菌箱 160⁓170 1⁓2h ③高压蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌锅 100kPa 121 15⁓30min 5、⑴配方比例

⑵称量纸 吸潮 ⑶牛肉膏 蛋白胨 琼脂 蒸馏水 调整PH ⑷调节pH 高压蒸汽灭菌法

⑸50

酒精灯火焰

③①④②

通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基

防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基造成污染

6、平板划线

稀释涂布平板

接种环

连续划线

一系列的梯度稀释

稀释度

涂布

一个（单个）

单个

7、⑴原有（可能存在） 上次划线 残留 上次划线的末端

增加

减少

残留（残存） 污染环境 感染操作者

⑵

末端

末端

起始处

增加 减少 单个（一个） ⑶

冷却

相连

划破

8、⑴

稀释涂布平板

a. 稀释度 一个菌落 一个活菌 菌落 活菌

（C÷V）×M

b. 30~300

重复组

一致

c. 低（少/小）

两个

多个

连在一起

一个菌落

⑵

显微镜直接计数

血细胞计数板（细菌计数板）

高（多/大）

无法区分活菌和死菌

9、①临时保藏法

频繁使用

固体斜面

4

②甘油管藏法

长期保存

甘油

－20

10、氮肥

氨

脲酶

11、目的菌株

营养

温度

PH

抑制

阻止

a. 细菌（和放线菌）

真菌（酵母菌和霉菌）

b. 固氮菌（固氮微生物）

N2

自养型微生物

CO2

c. 唯一氮源

抑制（阻止）

d. 高盐

失水

高温

酶

12、⑴形状

大小

隆起程度

颜色

⑵a. 酚红

变红

脲酶

氨

升高

b. 滤膜法

伊红美蓝

黑色

13、接种菌种的培养基

未（不）接种菌种的相同培养基

（接种菌种的）选择培养基

（接种菌种的）普通培养基（基础培养基、牛肉膏蛋白胨培养基）

14、复合

C1酶

CX酶

葡萄糖苷酶

纤维二糖

葡萄糖

15、刚果红染色法

红色复合物

纤维二糖

葡萄糖

纤维素分解菌

透明圈

16、⑴纤维素

⑵浓度

液体

唯一碳源

⑷

刚果红（CR）

a. 菌落之间发生混杂

b. 倒平板

淀粉

色素

透明圈

⑸透明圈

纤维素酶

葡萄糖