课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教案设计

湖南省安仁县第一中学

陈烨

课

题

备课时间

知识与

技能

课程目标

过程与

方法

情感态度与价值观

教学重点

教学难点

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

上课时间

总课时数

利用选择培养基分离细菌，用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

对土样的选取和选择培养基的配制

对分解尿素的细菌的计数

二次备教学过程

课

情境导入

上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

授新课

一.课题背景

1.尿素的利用

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用

2.细菌利用尿素的原因

土壤中的细菌将尿素分解为

氨和CO2

，这是因为细菌能合成

脲酶

。

3.常见的分解尿素的微生物

4.课题目的

①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌

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②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌

二.研究思路

（一）．筛选菌株

1.科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为

热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物

，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

2.实验室中微生物的筛选原理：

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

3.培养基选择分解尿素的微生物的原理

培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：

〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是

葡萄糖

，

提供氮源的的是

尿素

，琼脂的作用是

凝固剂

。

〖思考2〗该培养基对微生物

具有

（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是

只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长

。

（二）统计菌落数目：

1.显微镜直接计数：

2.间接计数法（活菌计数法）

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采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于

样品稀释液中一个活菌

。通过统计

平板上的菌落数

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 的平板进行计数。

〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是

（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

。

〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是

恰当的稀释度

。

〖思考5〗第

二

位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是第一位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验。

统计的菌落数比活菌的实际数目

低

。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是

一个

菌落。因此，统计结果一般用

菌落数

来表示。

（三）设置对照：

空白对照：不给对照组任何处理因素。

条件对照：给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的处理因素。

自身对照：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。

相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。

〖思考6〗请设计本实验的对照实验组：

方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。

方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。

三.实验设计 （一）土壤取样

（二）制备培养基

（三）样品的稀释

（四）取样涂布

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（五）微生物的培养与观察

菌落的特征包括

形状、大小、隆起程度、颜色

等方面。

〖思考8〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？

土壤中营养物质含量丰富，环境条件适宜等。

四.操作提示 1.无菌操作

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

2）应在火焰旁称取土壤 10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

2.做好标记

：实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

3.制定计划

：为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

小结：

当堂反馈

例1．对细菌群体生长规律测定的正确的表述是

A．在液体培养基上进行 B．至少接种一种细菌

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C．接种一个细菌 D．及时补充消耗的营养物质

解析：细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进行的。这些条件是：一种细菌、恒定容积的培养基，液体培养基、定时测定细菌总数。在这些条件下，才能测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；恒定容积是给微生物提供一定的生存环境；液体培养基才能通过样品推测细菌总数。若接种多种细菌，则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保证一定的接种量。答案：A 例2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是

A．调整期 B．对数期 C．稳定期 D．衰亡期

解析：种内斗争是一种生态因素。种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕，营养充足的时候，种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加，每个个体的生存空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源的争夺也越来越激烈，种内斗争就越来越激烈。由此可知，在稳定期的种内斗争最激烈。在衰亡期，微生物的数目已经开始减少，pH已经极度不适于微生物的生存，次级代谢产物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。答案：C 布置作业：完成基础训练相应题目

附：板书设计

教学后记：

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