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课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件配套优秀获奖教案｜教案在线预览

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关键词：课题2　土壤中分�…课件配套优秀获奖教案

正文

土壤分解尿素的细菌的分离与计数

一

课题目的

1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌

2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌

二、研究思路

(一)筛选菌种

1 实例：寻找耐高温的DNA聚合酶

PCR技术：要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。

启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

筛选原因:

因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，使耐热的Taq细菌保留下来。

2 实验室中微生物的筛选原理

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

思考：

该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？

碳源：葡萄糖、尿素

氮源：尿素

此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？

原则上能。只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存。

3 选择培养基：

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板等方法对它进行纯化培养分离。

如何对细菌进行计数？

1 显微镜直接计数：

利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

2 稀释涂布平板法（间接计数）

(二)统计菌落数目

方法

运用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。

原理

1个菌落←1个活菌

注意事项

①选择菌落数在30～300的平板上计数。

②需培养计算出三个或三个以上的平板菌落求平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

看课本P22，并讨论你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？第一位同学：没有重复实验（至少涂布3个平板）

第二位同学：A组结果误差过大，不应用于计算平均值

说明设置重复组的重要性。第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。这个实例启示学生，在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。

某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）

(

) A. 2.34×108 B. 2.34×109 C. 234 D. 23.4

每克样品中的菌株数

=（C÷V）×M (三)设置对照实验

设置对照的目的：

排除实验组中非测试因素对试验结果的影响，提高实验结果的可信度。

阅读P22～23页“（三）设置对照”一段讨论教材中提出的问题。

(1)A同学出现此结果的可能原因？

⑴土样不同

⑵培养基污染

(或混入了其他的含氮物质) (2)设置对照实验，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素？

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验

结果预测：如果结果与A同学一致，则证明______；如果结果不同，则证明A同学存在__________________ __________ 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。

这个实例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少

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课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件配套优秀获奖教案