课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计(第二课时)

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

（1）知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

（2）过程与方法

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

（3）情感、态度与价值观

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学的重点和难点

教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制

教学难点：对分解尿素的细菌的计数

三、教学过程

（一）引入新课

在上节课学习了培养基的配置以及接种技术基础上，教师提出新的课题：下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

（二）进行新课

1．课题背景

教师利用多媒体展示相关资料，分别介绍：1、尿素的利用；2、细菌利用尿素的原因3、常见的分解尿素的微生物。引出本课题的目的：①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；

②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。

2．研究思路

教师提问：根据本课题的目的，同学们觉得应该怎么研究？

探究活动1：

教师请学生分组进行讨论，请学生代表将各组的研究思路进行汇报。由教师最后总结出本课题的研究思路：(1).筛选菌株；(2).统计菌落数目；(3).设置对照。

(1).筛选菌株

教师利用多媒体展示资料：科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为

热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物

，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

教师总结：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

探究活动2：

教师请学生结合多媒体展示的问题分组讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基的配方，总结出培养基选择分解尿素的微生物的原理。

(2).统计菌落数目

教师分别介绍统计菌落常用的方法：直接计数法（显微镜直接计数）和间接计数法（稀释涂布平板法）。

探究活动3：

教师利用多媒体展示两位同学利用稀释涂布平板法操作后的不同实验结果，请同学们分组讨论两位同学的操作，并请学生代表指出两位同学操作的是否正确，该如何改进。

教师总结出稀释涂布平板法操作的注意事项。

(3).设置对照

教师提出：设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

探究活动4：

教师利用多媒体展示具体实验实例，请同学们分析操作是否正确，该如何改进。

教师最后总结对照试验的重要性。

3. 实验设计

由于实验场地，实验设备等的限制，教师利用多媒体播放实验过程的教学视频。

(1).土壤取样

教师介绍：从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。注意：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

(2).制备培养基

结合前面的学习内容，教师提出：制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。

(3)样品的稀释

教师介绍：样品稀释应在火焰旁称取土壤10g；在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行；分离不同的微生物采用不同的稀释度。

教师提问：为什么分离不同的微生物采用不同的稀释度？

(4)取样涂布

教师介绍：实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

(5)微生物的培养与观察

教师介绍：培养不同微生物往往需要不同培养温度。（菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。）

在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明实验不精确，需要重新实验。

4. 结果分析与评价

教师提示，实验结果可以从这些方面进行分析和评价：

通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物；

选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍数计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。

最后，教师总结整个实验的注意事项，对该课题进行适当延伸。

四、教学反思

本节课可以从尿素在农业上的重要应用切入，介绍能分解尿素的细菌，进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。在教学过程中，可以联系生产生活实际，使学生对尿素以及分解尿素的细菌形成一定的感性认识。对于实验中的研究思路，可以指导学生分组讨论，设计探究活动，提高学生的自主学习能力。但是，由于实验场地，实验设备等的限制，无法让学生亲自进行实验，不利于培养学生的实验探究能力。