课题3　分解纤维素的微生物的分离教案设计范例

高二生物 SW-17-02-39 探索的旅程不在于发现新大陆，而在于培养新视角。

《分解纤维素的微生物的分离》导学案

编写人：吴兰芳

审核人：高二生物备课组

编写时间：2018-3-19 学习小组编号___________ 姓名___________ 【学习目标】

1. 能简述纤维素酶的种类及作用，

2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3．能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术

【重点难点】：能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用

【学法指导】：

预习法、自学法、探究法

【学习过程】 一、自主学习：

（一）、纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

（二）、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的 发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

二 合作探究：

土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案

：

分解纤维素的微生物的分离的试验流程: 土壤取样→ →梯度稀释→ → 。

土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。

1.选择培养：

阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：

〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。

〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？

(1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在

上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养

。

17（4）梯度稀释：

依次将培养液稀释10～10倍。思考是如何操作的？

(5) 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

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(6)刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

〖思考3〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？

2.刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即

两种方法的优点与不足：

3.结果分析与评价

（1）为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。

（2）纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。

【课堂检测】：

61.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为10的培养基中得到以下几种统计结果，正确的是…( )

A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和2墨6，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233 2.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 D．接种了的选择培养基

3.在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是……………………( ) A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌

4.本实验关于选择培养目的叙述正确的是…( ) A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度

C．所用培养基是固体培养基 D．所用培养基是平板培养基

5．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………( )

A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 66.某同学在稀释倍数为10的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…( )

89A．2.34×10 B．2.34×10 C．234 D．23.4 67.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④

8.关于土壤取样的叙述错误的是………( )

A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm左右，再取样

C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D．应在火焰旁称取土壤

9．刚果红能与哪项物质形成红色复合物( ) A．纤维二糖 B．纤维素 C．葡萄糖 D．麦芽糖

【课后反思】：