课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案和学案内容

课题2、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

A、课型：

新知课。

B、课时安排：

2课时。

C、教学目标：

1、研究培养基对微生物的选择作用。

2、进行微生物数量的测定。

允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2、统计菌落数目：（提示课本）

（1）、方法：

A、显微直接计数法：

血细胞计数板计数法。

B、活细菌计数法：

常用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目。当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数量，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确，一般摆地摊菌落数在30—300的平板进行计数。

3、设置对照实验：

设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

二、实验设计：（提示课本）

1、土壤取样：

从肥沃、湿润的土壤中取样。用无菌小铁铲先铲去3cm左右的表层土，迅速取土壤装入无菌信封中密封，并记录好采土时间、地点、植被等情况。

2、制备培养基：

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基若干。

3、样品稀释：

（1）、原因：

（2）、稀释程度：

选用一定稀释范围的样品液进行培养，获得菌落数在30—300之间、适于计数的平板。

土壤细菌：

104、105

和106倍的稀释液进行平板培养，30—370C，1—2d。

土壤放线菌：

103、104

和105倍的稀释液进行平板培养，25—280C，5—7d。

土壤真菌：

D、教学重点：

1、对土壤的选取和选择培养基的配制。

E、教学难点：

1、对分解尿素的细菌的计数。

F、教学方法：

1、读书指导法。

2、引导启发法。

3、演示法。

G、教学用具：

1、多媒体教学课件。

H、教学内容及过程：

引言：

提问：1、尿素能被植物直接吸收吗？

↓

学生回答

↓

教师评价，引出：新课题。

一、研究思路：

植物不能吸收尿素，能合成脲酶的细菌通过脲酶催化尿素分解成氨可以被植物吸收。

1、筛选菌株（目的菌株）：

（1）、原理：（提示课本）

人为提供有利于目的菌株生长繁殖的条件（营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

（2）、选择培养基：

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102、103

和104倍的稀释液进行平板培养，25—280C，3—4d。

4、取样涂布：

5、微生物的培养和观察：

不同种类的微生物培养时间和温度不同。

每隔24h统计一次菌落数目，最后撷取菌落数目稳定时的记录作为结果。

不同种类的微生物，其菌落形状、大小、隆起程度和颜色等方面不同。

6、细菌的计数：

当菌落数稳定时，取同一稀释度的3个平板进行计数，求出菌落数的平均值，并根据对应的稀释度计算出样品中细菌数目。

三、操作提示：（提示课本）

1、无菌操作：

（1）、取土样的用具在使用前要灭菌

。

（2）、应在火焰旁称取土壤，在火焰附近将土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞

。

（3）、稀释土壤溶液过程中，每一步都要在火焰旁操作。

2、做好标记：

对平板和试管做好标记（培养基种类、培养日期、稀释度等）。

3、制定计划：

四、菌种鉴定：（提示课本）

细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基碱性增强，PH升高。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌后，培养基变红，初步鉴定该细菌能分解尿素。

五、结果分析与评价：

总结：

理解。

课后练习：

1、课本81页练习1、2 。

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