课题2　月季的花药培养教学实录

月季的花药培养教学设计

常德市三中

庞业军

一、教学目标

1、说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。

2、说出影响花药培养的因素。

3、学习花药培养的基本技术。

4、尝试用月季或其他植物的花药进行培养。

二、教学重点

1、被子植物花粉的发育过程

2、产生花粉植株的两种途径

三、教学难点

1、卵细胞形成过程

2、花药离体培养的过程

四、教学过程

一）基础知识

（一）认识花的结构：

（二）掌握花粉的发育过程

（三）了解卵细胞的发育过程

（四）产生花粉植株的两种途径

途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株；

途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。

人工种子是由外植体通过组织培养而获得的胚状体，然后加上人造胚乳，人造种皮而制成。

两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。

（五）影响花药培养的因素

1、主要的影响因素：材料的选择与培养基的组成

①选材

②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素

③单核期花药的挑选

④培养基的组成

2、其他因素

亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功都有一定的影响。

二）月季花药培养的实验操作

1、材料的选取

(1)选择花药：

一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。

(2)检查方法

①最常用的方法有醋酸洋红法

②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。

2、材料的消毒

(1)用酒精处理

①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒，立即取出。

②无菌水清洗

③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分

(2)用消毒液(氯化汞)处理

①

放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2-4分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液) ②

无菌水冲洗3-5次

用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。

3、接种和培养

(1)剥取花药

①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织

②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成

(2)接种

(3)培养

4、鉴定和筛选

三）结果分析与评价

1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用醋酸洋红法或焙花青-铬矾法检测单核靠边期的花粉粒。

2、花药出现污染的原因：

(1)消毒不彻底；

(2)接种室污染；

(3)人为因素的交叉污染等。

课堂小结：

练习：

1、下表是某培养液成分含量表，请回答：

编号

①

②

③

④

⑤

⑥

成分

（NH4）HCO3

KH2PO4

CaSO4

FeCl2

维生素

水

含量

0.5g

3.0 g

0.5g

0.5g

少许

1000mL

（1）若用于培养微生物，该培养液中有

_类营养物质，可培养的微生物同化作用类型是____

___。

（2）此营养液若用来培养固氮微生物，则应除去的成分是__

__ ，应加入的物质是___

____。

（3）若用该培养液培养大肠杆菌，应加入的物质是__

_____ ，为检测大肠杆菌的存在与否还应加入___

____和___

____，将呈现__

______反应。

（4）此培养液若用于培养金黄色葡萄球菌并观察菌落形态，除有机物外还应加入_______，为使其正常生长繁殖，同时又抑制其他杂菌，还应加入______________。

（5）此培养液若用于植物组织培养，

还应加入_____________________和___

____。

（6）各种成分在熔化后分装前必须进行_____

__，接种前要进行___

____。

参考答案：

（1）五

自养型

（2）①

有机物

（3）有机物

伊红----美蓝

黑色

（4）琼脂

高浓度食盐

（5）蔗糖、Mg2+

等

琼脂

（6）调整pH

灭菌

2、已知水稻抗病（R）对感病（r）为显性，有芒（B）对无芒（b）为显性，两对基因自由

组合，体细胞染色体数为24条．现用单倍体育种方法选育抗病、有芒水稻新品种。

（1）诱导单倍体所用的花药，应取自基因型为____

__的植株。

（2）为获得上述植株，应采用基因型为___

___和____

__的两亲本进行杂交。

（3）在培养过程中，单倍体有一部分能自然加倍成为二倍体植株，该二倍体植株花粉表现____

__（可育或不育），结实性为___

___（结实或不结实），体细胞染色体数为______。

（4）在培养过程中，一部分花药壁细胞能发育成为植株，该植株的花粉表现___

___（可育或不育），结实性为__

____（结实或不结实）．体细胞染色体数为__

____。

（5）自然加倍植株和花药壁植株中都存在抗病、有芒的表现型．为获得稳定遗传的抗病、有芒新品种，本实验应选以上两种植株中的___

___植株，因为自然加倍植株__

____花药壁植株___

___。

（6）鉴别上述自然加倍植株与花药壁植株的方法是___

___。

参考答案：

（1）RrBb （2）RRbb rrBB （3）可育 结实 24条 （4）可育 结实 24条

（5）自然加倍 基因型纯合 基因型杂合

（6）将植株分别自交，子代性状表现一致的是自然加倍植株，子代性状分离的是花药壁植株