复习与测试教案范文

专题2 微生物的培养与应用

导学案

知识系统构建

规律方法整合

整合一

常见的消毒灭菌方法比较

方法

操作过程

应用范围

煮沸消毒法

℃煮沸

min 日常生活中广泛使用

巴氏消毒法

在

℃煮30 min或在

℃煮15 min

化学药剂

用体积分数为70%～75%的消毒法

乙醇、碘酒涂抹，来苏水喷

洒等

紫外线

消毒法

30 W紫外灯照射

min

消毒

灼烧灭菌法

酒精灯火焰灼烧

干热灭菌法

干热灭菌箱

℃加热

h

高压蒸汽

kPa、

℃维持灭菌法

15～30 min

例1

微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是(

) ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

④培养基要进行高压蒸汽灭菌

⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

A.①

B.②③

C.③④

D.③⑤

整合二

微生物的纯化培养技术

1.技术流程

2.流程解读

(1)无菌技术：主要指消毒和灭菌，实验中对操作者和操作空间进行消毒，对实验用具和培养基进行灭菌。实验过程中严格遵循无菌技术。

(2)倒平板：待培养基冷却到

左右时，在

附近倒平板。

(3)平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面

，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，培养后获得由

繁殖形成的菌落，从而实现菌种的纯化培养。

(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行系列

后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成

，从而在培养基表面形成单个菌落，实现菌种的纯化培养。

易错易混

1自然界中多种微生物混杂在一起，研究菌种时需要将它们分离开来，微生物的纯化培养技术实现了菌种的分离。

2平板划线法操作简单，常用于微生物的分离；稀释涂布平板法操作复杂，稀释度足够高时，培养基上生长的菌落大都是由单个细菌形成的，除用于微生物的分离外，还可进行细菌的计数。

例2

1943年，曾获诺贝尔生理学或医学奖的美国科学家鲁里亚和德尔布吕克设计实验，研究大肠杆菌的抗噬菌体突变是发生在接触噬菌体之前还是之后。请阅读以下资料回答下列问题：

尿素分解菌的分离

提供有利于目的菌株生长的纤维素分解菌的分离

培养皿中培养基的基本配方：

配方

蛋白胨

乳糖

KH美2PO4

水

琼脂

20%伊红0.325%水溶液

蓝水溶液

pH 含量

10 g 10 g 2 g 1 000 mL 25 g 20 mL 20 mL 7.2～7.4

(1)在培养基中加噬菌体的作用是

；加伊红与美蓝的目的是

。

(2)由于大肠杆菌的同化作用类型是

，因此，在培养基中还加入了一些相应的物质，其中

是大肠杆菌生长的主要碳源，

是氮源。

(3)从生态学的角度看，噬菌体与大肠杆菌这两种生物之间的关系是

。

(4)该实验有两个假设：

假设一：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前。

假设二：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之后。

你认为图中的实验结果支持上述哪个假设：

，如果另一个假设成立的话，实验结果应该是：

。

(5)在这个实验设计中，研究者根据培养皿中菌落数的差异推断，从而证明假设的成立。请你分析出现A4和A5实验结果的原因：

。

整合三

有关分解尿素的细菌和纤维素分解菌的比较

1.对比分析尿素分解菌和纤维素分解菌的分离和鉴定

原理

条件(如营养、温度、pH等)，

同时抑制其他微生物的生长，常用选择培养基筛选

土壤取样→样品稀释→培养土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布于过程

与观察

含刚果红(CR)鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落→进一步鉴定

鉴定

指示剂(变

)

(产生

)

培养基（功能上）：培养基

固体培养基，以

为唯一选择培养基：液体，富含

氮源

鉴别培养基：固体，加入

2.分解尿素的细菌和纤维素分解菌的分离流程比较

分离流程

分解尿素的细菌

纤维素分解菌

土壤取样

选择富含有机质的土壤

选择富含

的环境

选择培养

不进行选择培养

液体选择培养基，增加纤维素分解菌的浓度

梯度稀释

梯度稀释到104、105、106倍

梯度稀释101～106倍

涂布平板

涂布到选择培养基

涂布到鉴别培养基

菌种鉴定

培养基中加入

指示剂

培养基中加入

染色剂

例3

下列关于尿素分解菌和纤维素分解菌的分离的叙述中，错误的是(

) A.前者需要以尿素为唯一的氮源，后者需要以纤维素为唯一的碳源

B.尿素分解菌能产生脲酶，纤维素分解菌能产生纤维素酶

C.两个过程中都需要梯度稀释

D.刚果红染色法也可以用于鉴定尿素分解菌

必背要语

1.实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。

2.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。长期保存菌种可以采用甘油管藏法。

3.稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比实际活菌数目低。

4.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。

5.鉴定分解尿素的细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，据是否变红进行判断。

6.纤维素酶的作用是：纤维素―C和―1酶葡萄糖C―X→酶纤维二糖―苷酶――→葡萄糖。

7.刚果红与纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。