课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优质课教案整理

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计

第1课时 一、教学目标

（一）知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

（二）过程与方法

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

（三）情感、态度与价值观

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重难点

（一）教学重点：

对土样的选取和选择培养基的配制

（二）教学难点：

对分解尿素的细菌的计数

三、教学工具：多媒体课件

四、教学过程

（一）导入新课

上一课题我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

（二）进行新课

课题背景: 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2 ，这是因为细菌能合成脲酶

。

探究一：研究思路

(一)筛选菌株

1.实验室中微生物的筛选原理：

科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物

，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

2.选择培养基的定义：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

课件展示本课题使用的培养基的配方

讨论1：从物理性质看此培养基属于哪类？从功能上属于哪类培养基？

答：从物理性质看此培养基属于固体培养基；从功能上属于选择培养基。

讨论2：在此培养基中哪些作为碳源、氮源？

答：在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的的是尿素。

(二)计数方法：

1.稀释涂布平板法

(1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

(2)公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M (3)实例：根据教材实例：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到的两种统计结果。讨论：你认为哪位同学的结果更接近真实值？这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如何改进？

答：第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，不遵循平行重复原则，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。

(4)注意事项

①为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中,经涂布,培养计算出菌落平均数。

②为了保便于计数，保证结果准确，一般选择菌落数在30~300之间的平板进行计数。

③统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

④为提高实验结果的可信度还应设置对照。

2.显微镜直接计数法也是测定微生物数量的常用方法。

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。

（略）

讨论：如何对血球计数板中的微生物进行计数？

（略）

（三）设置对照

1.设置对照的目的：排除实验组中非测试因素(无关变量)对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

2.设置对照的方法：

(1)空白对照：不给对照组任何处理因素。

(2)相互对照(对比实验)：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。

(3)自身对照(前后对照)：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。

3.实例:在做本课题的实验时，A同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落。但是，其它同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。

讨论1：证明是由于土样不同影响实验结果的实验设计思路。

答：可以由其他同学用与A同学一样的土样进行相互对照实验。如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。

讨论2：证明是由于培养基污染影响实验结果的实验设计思路。本实例你得到的启示是？

答：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。可见，做实验时一定要设置对照。

五、课堂小结

六、课内巩固练习

1.使用选择培养基的目的是（ ）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

2.下列说法不正确的是（ ）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

七、板书设计

专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课题背景: 探究一：研究思路

(一)筛选菌株

1.实验室中微生物的筛选原理：

2.选择培养基的定义：

(二)计数方法：

1.稀释涂布平板法

(1)原理：

(2)公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M (3)实例

(4)注意事项

2.显微镜直接计数法也是测定微生物数量的常用方法。

（三）设置对照

1.设置对照的目的：

2.设置对照的方法：

3.实例: