课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计内容推荐

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

教学设计

【考纲要求】

1.

微生物的分离和培养

2.

培养基对微生物的选择作用

3.

某种微生物数量的测定

4.

微生物在其他方面的应用

【课题重难点】

重点：对土样的选取和培养基的配置

难点：微生物的计数

【知识要点和教学方法】

一、筛选菌株

知识要点：微生物的选择培养，是指利用培养基的组成使适宜生长的特定微生物得到较快繁殖的技术，也称为微生物的“选择培养”。在有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物，还需要进一步的验证。

教学方法：根据教材上的事例，分析寻找菌株的要点，再根据书上的培养基配方，分析选择培养的方法。

二、设置对照

知识要点：设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。实验对照的设置思路。

教学方法：根据筛选菌株的案例，引导学生思考分析应该如何设置对照，并说明对照组的重要性。

三、统计菌落数目

知识要点：统计菌落数目的理论依据是：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在 30~300的平板进行计数。

教学方法：教材中用楷体字编排的实例是为了说明设置重复组的重要性。根据这个实例，启示学生。

【课型课时】复习课 1课时

【复习过程】

★课题背景，导入课程

通过尿素的视频介绍引出，尿素是一种重要的农业氮肥，但是不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利于。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们合成脲酶。

2NH3+CO2

CO(NH2)2+H2O脲酶有的生物公司就从中发现了商机，制造出“微生物菌肥”（视频介绍）。制作“微生物菌肥”需要分离纯化出相应的活菌，本课题就是以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到两个主要目标：(1)从土壤中分离出能够分解尿素的细菌；(2)统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。

★研究思路

1.

筛选菌株

在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。实验室中微生物的筛选，应用了同样的原理：人为提供有利于目的菌株生长的

条件，同时抑制或阻止其他微生物生长——以尿素为唯一氮源的选择培养基。

2.

设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

Q：本实验怎么设置对照组，以判断选择培养基是否起到了选择作用？

A：牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，其上生长的菌落数目明显多于选择培养基。

3.

统计菌落数目

Ⅰ

显微镜直接计数

利用血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

缺点：

不能区分死菌与活菌；

不适于对运动细菌的计数；

需要相对高的细菌浓度；

个体小的细菌在显微镜下难以观察。

Ⅱ

活菌计数法（间接计数法）

⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，即一个菌落代表原先的一个单细胞。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

⑵常用方法：稀释涂布平板法。

计算公式：每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M 其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。

※注意事项

①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板上进行计数。

②为使结果接近真实值,可将同一稀释度的菌液加到三个或三个以上的平板中，经涂布，培养计算出菌落平均数。

③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。

统计微生物数目方法 显微镜直接计数法

活菌计数法(通过菌落间接计数) ★实验设计

★结果分析与评价

1.结合对照，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。

2.是否获得了某一稀释度下，菌落数目在30~300的平板。在这一稀释度下，是否至少有两个平板的菌落数相接近？

3.你统计的每克土壤中含有能分解尿素的细菌的菌落数是多少？与其他同学的结果接近嘛？如果差异很大，可能是什么原因引起的？

★课题延伸

1.

对分解尿素的细菌初步筛选后，要对菌种作进一步鉴定，还需要生物化学的方法；

2.

细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基碱性增强，pH升高，我们可

以通过检测pH的变化来判断是否发生该化学反应；

3.

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，也可以鉴定这种细菌能否分解尿素。

★巩固练习

【板书设计】

§土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、课题背景

二、研究思路

三、实验设计 四、结果分析与评价

五、课题延伸

（C➗V）✖M