附录4　常用的消毒灭菌操作方法名师教学设计2

课题

附录4常用的消毒灭菌方法

沈阳市第四中学陈丽丽

一、课题目标

（一）知识与技能[来源:Z*xx*k.Com]

网]掌握实验室中常见的消毒、灭菌方法

（二）过程与方法

由发酵食品制作中所需要的微生物入手，引导学生如何培养微生物，如何成功的培养一种微生物，进而研究生活中以及实验室中所需要的消毒灭菌方法。

（三）情感、态度与价值观

形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神

二、课题重点：无菌技术的操作

三、课题难点：无菌技术的操作

四、教学方法：启发式教学及学生分组操作

五、教学工具：多媒体课件

六、教学过程

（一）引入新课

由前面学习的发酵食品制作离不开微生物的培养，如何在实验室中成功的培养我们所需要的微生物，并且要避免杂菌污染引导学生思考。（二）进行新课

新课教学的思路为先设计问题让学生通过看书寻找答案，然后学生进行回答，最后老师再根据学生的回答进行补充总结。

1、消毒

什么是消毒？分析消毒的概念

常见的消毒方法有哪些？分析实例用到了哪些消毒方法？总结常见的消毒措施。区分比较煮沸和巴氏消毒。常见的化学消毒方法有哪些？学生回答

（1）日常生活经常用到的是

煮沸

消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用

巴氏

消毒法（比较与煮沸的区别，好处）；（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒

石炭酸或煤酚皂

等溶液以增强消毒效果，然后使用

紫外线

进行物理消毒。（4）实验操作者的双手使用

酒精

进行消毒；（5）饮水水源用

源:Zxxk.Com]

氯气

进行消毒。

2、灭菌

什么是灭菌? 解释与消毒在概念上的区别。学生回答

常见的灭菌方法有哪些？一一介绍灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌的操作细节，操作对象，操作中的注意事项。

（1）

灼烧灭菌：演示酒精灯灼烧接种环、试管口。分析可以灼烧灭菌的对象，灼烧灭菌的好处，用火焰什么位置灼烧比较适合？学生回答

试管口可以灼烧灭菌，试管内部如何灭菌？

（2）

干热灭菌：装置、使用方法、注意事项

①装置：干热灭菌箱

②操作方法：装入待灭菌的操作方法。教师演示如何将试管塞上棉塞，如何将塞好棉花的试管用报纸包好，演示如何用报纸包好。分析为什么物品不要摆得太整齐等事项。学生动手操作。

灭菌。如何控制温度和时间？学生回答

降温。

开箱取物。有何注意事项？学生回答

培养皿可以用干热灭菌方法灭菌，培养基如何灭菌呢？

（3）

高压蒸汽灭菌

①装置：高压蒸汽灭菌锅。实物讲解高压蒸汽灭菌锅的构造

②操作方法：学生阅读、讨论教材85页内容。教师讲解使用方法。结合图片及实物，学生认识并学会使用高压蒸汽灭菌锅。

物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是

有利于锅内温度升高

；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 100k Pa，温度为 121℃

，并维持 15～30 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至

零

时打开锅盖，其目的是防止

容器中的液体冲出容器，造成污染 。

学生讨论回答相关问题

（4）紫外线灭菌

只适用于表面灭菌和空气灭菌。

3、常见物品及灭菌方法

（1）接种环、接种针、试管口等使用

灼烧

灭菌法；

（2）玻璃器皿、金属用具等使用

干热

灭菌法，所用器械是

干热灭菌箱

；

（3）培养基、无菌水等使用

高压蒸汽

灭菌法，所用器械是

高压蒸汽灭菌锅

。（4）表面灭菌和空气灭菌等使用

紫外线

灭菌法，所用器械是

紫外灯

。

4、消毒、灭菌比较

比较项

理化因素的作用强度

消毒

灭菌

较为温和

强烈

消毒

概念

指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部

的 微生物(不包括 ) 常用方法

煮沸消毒法、 巴氏消毒法、

化学药剂消毒法、紫外线消毒法

操作空间、液体、双手等

灼烧灭菌、 干热灭菌、

高压蒸汽灭菌

消灭微生物的数量

部分生活状态的微生物

全部微生物

芽孢和孢子能否被消灭

不能

能

灭菌

指使用强烈的理化因素杀死物体内外 微生物，包括 。

适用对象

接种环、接种针、玻璃器皿，培养基等

七、巩固练习

1 、请判断以下材料或用具需要消毒还是灭菌

（1）培养细菌的用的培养基

（2）培养有害微生物的实验室空气

（3）稀释用的移液管和试管

2 、防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是

A 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒

B 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌

C 在实验室中，切不可以吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染

D 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境

八、课后作业

1．煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是(

) A.温度不同 B.时间不同

C.前者适用于固体消毒,后者适用于液体消毒 D.没有区别

2.下列操作属于灭菌的是(

) A.接种前用火焰灼烧接种环

B.接种前用酒精擦拭双手

C.将平板倒置,放入培养箱中培养

D.接种在酒精灯的火焰旁完成

3.细菌培养基常在121 ℃高压蒸汽灭菌锅中灭菌。如果只是在100 ℃温度下将细菌培养基灭菌,下列生物仍会存活的是(

) A.大肠杆菌

B.一种青霉菌

C.枯草芽孢杆菌的芽孢

D.沙门氏菌

4.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是(

) ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒

④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌

⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

A．①③ B．②④ C．③⑤ D．④⑥

答案

A A C D