课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计模板

专题2 微生物的培养与应用

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、学习目标

1、知识目标：通过实施"土壤中分解尿素的细菌的分离与计数"教学,让学生学会微生物的选择培养、分离、计数等技术的原理和方法,理解选择性培养基和鉴别性培养基的作用。

2、能力目标：能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中微生物的计数。

二、学习重点、难点：

重点：对土样的选取和选择培养基的配制。

难点：对分解尿素的细菌的计数。

三、学法指导：小组交流合作；一对一检查通关。

四、自主学习：

1、尿素是一种重要的农业氮肥，但农作物

(能、不能)直接吸收利用，而是首先通过

将尿素在

的催化下分解为氨之后，才能被植物吸收。

2、统计菌落数目

(1)测定微生物数量的常用方法有

和

。

(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目。计算公式：每克样品中的菌株数＝

。其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。

①为了保证结果准确，一般设置

平板，选择菌落数在

的平板进行计数，并取

。

②统计的菌落数往往比活菌的实际数目

，因此，统计结果一般用

而不是用

来表示。

3．设置对照

设置对照的主要目的是

4．操作步骤：土壤取样→ →微生物的

。

5．样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同，请填写下表：

微生物

稀释倍数

细菌

放线菌

真菌

6、分解尿素的细菌合成的

将尿素分解成了

，使培养基的碱性增强。在以

为

的培养基中加入

指示剂培养细菌，若指示剂变红，可以初步鉴定

。

7、将已知体积的水过滤后，将滤膜放在

培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现

。可以根据培养基上菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量，这叫

法。

二、练习提升

1、（2017湖南郴州第四次质检，37）分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中，某生物实验小组尝试对分解教师的微生物进行分离与计数。请回答下列问题：（15分）

（1）分解尿素的微生物含有的酶是

；配置培养基时应以

作为唯一氮源。

（2）进一步鉴定，还需要借助

的方法，在培养基中添加

作为指示剂，培养后培养基pH会

（填升高或降低），可使指示剂变红色。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是

。

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板线培养一段时间，这样做的目的是

；然后将1ml样液稀释10000倍，在3个平板上用涂布法分别涂布0.1ml稀释液；经适当培养后，3个平板的的菌落数分别为39、42、45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为

个。

2、下表为土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题使用的培养基，分析培养基配方，回答下面的问题。

KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4•7H2O

0.2g 葡萄糖

尿素

1.0g 琼脂

15.0g 用蒸馏水定容到1000mL (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是____________________。

(2)按物理性质划分该培养基属于________培养基，理由是培养基中含有________________；该类培养基常用于微生物的______________________等。

(3)由于______________________________________，

所以该培养基只能用于能够合成________________的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出______________的细菌。

(4)在微生物学中，将________________________________________的培养基，称作选择培养基。

【答案】

1、基础：不能，土壤中的细菌，脲酶，稀释涂布平板法，显微镜直接计数法，(C÷V)×M，多于3个，30～300，平均数，少，菌落数，活菌数，排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。样品的稀释，培养与观察，10、10、10 10、10、10456 345 10.0g 10、10、10脲酶，氨，234 尿素为唯一氮源，酚红，该种细菌能够分解尿素。伊红美蓝、黑色、滤膜法。

2、练习：脲酶、尿素、生物化学、酚红、升高、过滤法灭菌、检测培养基平板灭菌是否合格、

4.2*106

(1)葡萄糖和尿素

(2)固体

琼脂

纯化、分离、计数

(3)培养基中只有尿素一种氮源

脲酶

分解尿素

(4)允许特定种类的微生物生长，并能抑制或阻止其他种类微生物生长