课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学实录与评析

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

知识目标：1、分离微生物的原理；

2、统计细菌数目的方法；

能力目标：1、研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。

2、分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性。

情感态度和价值观：

1、形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯。

二、教学重难点

教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制。

教学难点：对分解尿素的细菌的计数。

三、教学过程

1、课前准备

教师准备好课堂中用到的图片，搜集资料充分备课；学生做好导学。

2、导入新课

复习微生物培养的基础知识，这样学生对知识的接受能力也会增强。

3、讲授新课

（1）基础知识

学生阅读课题背景交流表述尿素的特点及作用。尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

氨和CO2

，这是因为细菌能合成

脲酶

。

（2）筛选菌株

阅读“筛选菌株”,思考并回答以下问题：

1、提问:生物与环境之间的关系?

（学生：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。）

2、特殊的培养基能筛选出特殊的微生物吗?（学生：通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物）

3、在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是什么？提供氮源的是什么？琼脂的作用是什么？（学生：葡萄糖，尿素，凝固剂）

（3）统计菌落数目

常用来统计样品中活菌数目的方法是

稀释涂布平板法

。除此之外，显微镜直接微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。

1.

为什么是活菌数? 2.

怎么计算? （学生：在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数）

3.

为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？（学生：这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。）

（4）设置对照

1.怎么设置对照说明培养基是无菌的？

2.怎么设置对照说明培养基发挥了选择功能？

3.怎么设置对照说明菌落数是有效的？

（5）实验设计

土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌.尝试进行分解纤维素的微生物的分离。不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104，培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25－28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d，在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面。

1、有哪些重要环节？

2、各环节需要哪些工具？

3、操作时注意的问题？（学生：取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。应在火焰旁称取土壤

10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

4、

怎么鉴定？（学生：在以

尿素

为唯一氮源的培养基中加入

酚红

指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变

红

，说明该细菌

能够

分解尿素

。

（5）习题演练

1.利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是（

）

A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌

B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌

C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌

D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌

2．下列操作不属于微生物的分离步骤的是（

）

A．

稀释

B．划线或涂布

C．接斜面

D．培养

四、教学反思

以上教学过程充分挖掘了该课题的教学价值，使课程标准中“微生物的分离与培养、微生物计数、选择性培养基的选择作用”等具体要求得到有效落实，同时，该教学过程较好地处理了知识性内容与操作性内容及课堂与课后的关系，可起到节约时间，提高教学效率的效果，还可以联系生产生活实际。

五、板书设计

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、

基础知识

二、

筛选菌株

三、

统计菌落数目

四、

设置对照

五、

实验设计