复习与测试多媒体教学设计及其点评

知识点

1.培养基的成分种类及微生物的培养

2.微生物的分离与计数

3.综合考查

非选择题:本大题共6小题,共90分

题号及难易度

1(中)、4 2(中)、3 5、6 1.(2014·南充模考)(15分)下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方: KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O 葡萄糖

尿素

1.4 g 2.1 g 0.2 g 琼脂

蒸馏水

定容至

10.0 g 1.0 g 15.0 g 1 000 mL 请根据以上配方,回答下列问题: (1)该培养基含有微生物所需要的

类营养物质。其中最主要的碳源是

,氮源是

。

(2)该培养基按物理性质划分是

培养基;按培养基的作用划分是

培养基。

(3)该培养基具有选择作用的原因是

。

(4)在该培养基中,可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解,依据的原理是

。

所用方法是在培养基中加入

指示剂,如果尿素被分解,则培养基变成

色。

解析:(1)该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类营养物质,葡萄糖是最主要的碳源,尿素是氮源。(2)由于有凝固剂琼脂的存在,该培养基属于固体培养基。(3)由于尿素是该培养基的唯一氮源,只有能分解尿素的微生物才能生长,因此该培养基属于选择培养基。(4)尿素被分解可产生氨,氨能使酚红指示剂变成红色,据此可推测培养基中的尿素是否被分解。

答案:(1)4 葡萄糖

尿素

(2)固体

选择

(3)该培养基中唯一的氮源是尿素,只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖

(4)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高

酚红

红

2.(2014·南京模拟)(15分)从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是采集菌样→选择培养→纯化分离→性能测定。

(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从

环境采集。

(2)选择培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其在群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶的微生物的选择培养应选择

的培养基,并在

条件下培养。

(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是

,获得图B效果的接种方法是

。

(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行

,接种前要进行

,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在

条件下进行。

解析:(1)嗜盐菌的菌样应从高盐环境中采集。(2)微生物产生淀粉酶,说明其碳源是淀粉,应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养。(3)图A菌落分布较均匀,接种方法是稀释涂布平板法,图B菌落集中呈线状,接种方法是平板划线法。(4)配制培养基时,各种成分在溶化后分装前,必须调整pH,接种前要进行高压蒸汽灭菌,实验中要注意在无菌条件下进行。

答案:(1)海滩等高盐

(2)以淀粉为唯一碳源

高温

(3)稀释涂布平板法

平板划线法

(4)调整pH 高压蒸汽灭菌

无菌

3.(2014·河北正定高三三轮模拟)(15分)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。

实验步骤: (1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

(2)为了得到更加准确的结果,你选用

法接种样品。

(3)适宜温度下培养。

结果分析:①测定大肠杆菌数时,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是

,其理由是

。

A.一个平板,统计的菌落数是230 B.两个平板,统计的菌落数是220和260,取平均值240 C.三个平板,统计的菌落数分别是210、50和520,取平均值260 D.四个平板,统计的菌落数分别是210、300、240和250,取平均值250 ②一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是

(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。

③用这种方法测定的大肠杆菌密度,实际活菌数量要比测得的数量

,因为

。

解析:实验步骤:为了得到更加准确的结果,应用稀释涂布平板法接种样品。结果分析:①选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。

②234÷0.1×105=2.34×108。③因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。

答案:实验步骤:(2)稀释涂布平板

结果分析:①D 在设计实验时,一定要涂布至少三个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性;在分析实验结果时,要考虑所设置的重复组的结果是否合理

②2.34×108

③多

当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落

4.(2015·如皋中学质检)(15分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题: (1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方如下: 牛肉膏

5.0 g 蛋白胨

10.0 g NaCl 5.0 g 琼脂

20.0 g 蒸馏水

定容至1 000 mL 其中提供氮源的是

;提供碳源的主要物质是

。

(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的

。在烧杯中加入琼脂后要不停地

,防止

。

(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入

中灭菌,压力100 kPa,

温度

,时间

。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然下降,当压力表压力降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基,此试管应

。

(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入

。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。

(5)从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯

(填“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环

后蘸取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管在适温下培养,长成菌落后放入

℃冰箱中保藏。

解析:凡能提供所需氮元素的物质为氮源,牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。在配制培养基时营养要协调,按所培养微生物对各种成分的需求确定;在加入琼脂后,要不断搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅,在压力为100 kPa、温度为121 ℃条件下,灭菌15～30 min。酒精灯外焰温度高,灭菌效果好。灼烧后待冷却再蘸取菌种,否则会烫死菌种,造成实验失败。

答案:(1)牛肉膏、蛋白胨

牛肉膏

(2)比例

用玻璃棒搅拌

琼脂糊底引起烧杯破裂

(3)高压蒸汽灭菌锅

121 ℃

15～30 min 废弃

(4)适量水

(5)外

冷却

4

5.(15分)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施,请回答下列与检验饮用水有关的问题。

(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为

。在下面所示的四种菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是

。

(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?

。为什么?

。

(3)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌?

。

。

解析:纯化大肠杆菌的方法——稀释涂布平板法和平板划线法。删除偏差太大的数据,对剩下的多个培养数据进行平均处理就可以得到水

样中的大肠杆菌数。大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,通过密封培养,大肠杆菌可以进行无氧呼吸产生气体,以气泡的形式释放出来。

答案:(1)稀释涂布平板法

D (2)需要

因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格) (3)通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样,再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满,塞上塞子,混匀后置于37 ℃恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成,则说明水样中有大肠杆菌

6.(2014·安徽安庆六校第三次联考)(15分)据报道,从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标,“细菌门”事件引起公众普遍关注。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题。

(1)某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌,请帮他们完善下列步骤。

①配制培养基:称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等,加入蒸馏水,搅拌加热至完全溶解后调节pH,分装到锥形瓶后进行

,在无菌状态下加入卵黄液(100 mL 10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄,振荡均匀)摇匀后立即倒平板。

②接种:取待检测果汁2.5 mL加入22.5 mL灭菌生理盐水中,制成接种样液。

实验组:将接种样液用

法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组:将

用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为

对照。将上述接种后的培养皿同时放在36 ℃的恒温箱中培养48 h。

③观察:观察培养基表面

。

(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供

。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液,所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来,此培养基属于

培养基。

(3)若要统计某土壤样品中该活菌数目,宜采用

法。

解析:(1)①要达到无菌状态,先要进行灭菌处理。

②对照组采用的是平板划线法,根据实验无关变量相同原则,实验组也应采用平板划线法;对照组是不加处理的组,但为了体现无关变量相同的原则,应接种等量的无菌生理盐水,这种对照叫空白对照。

③根据题意,葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环,所以应观察是否出现周围有乳浊环的菌落。

(2)细菌的生长需要碳源、氮源、水、无机盐、促生长因子等,牛肉膏和蛋白胨主要是提供碳源和氮源。

(3)统计活菌的数目,常用的方法是稀释涂布平板法,通过计数菌落的数量,然后换算出活菌的数量。

答案:(1)①灭菌

②平板划线

无菌生理盐水

空白

③是否出现周围有乳浊环的菌落

(2)碳源和氮源

选择

(3)稀释涂布平板