课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课堂实录及点评

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》的教学设计

砚山县第一中学校 田永波

教学目的

1.

了解实验室筛选菌株的原理

2.

学会测定微生物数量的方法

3.

尝试从土壤中分离分解尿素的细菌并进行计数

教学重点

1.

了解实验室筛选菌株的原理

2.

学会测定微生物数量的方法

教学难点

尝试从土壤中分离出分解尿素的细菌并进行计数

教学方法

问题引导教学法，分组实验法

教学工具

多媒体课件

课时2（其中一个课时为实验) 教学过程

课时1 【导入物】利用教材的课题背景导入新课，尿素要分解成氨之后才能被植物吸收，而会分解尿素的细菌是因为其能产生脲酶。

CO(NH2)2+H2O

脲酶

CO2+2NH3

【提问】通过前面的学习我们知道土壤中有许多微生物，如何可以从土壤中混杂的微生物中筛选出会分解尿素的细菌呢？

【学生】阅读教材21页内容找出实验室筛选菌株的原理

【教师】实验室筛选菌株的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。

【提问】根据原理分析用到的培养基从功能上讲属于什么培养基？

【学生】选择培养基

【提问】筛选分解尿素的细菌的选择培养基有什么特点？如何配制？

【学生】思考，并推测能让分解尿素的细菌生长而其他微生物不能生长。

【教师】引导学生分析课题中使用的培养基配方，并得出此培养基的特点是以尿素为唯一的氮源，原则上只能让分解尿素的微生物生长。从该培养基配方中的分析其营养成分有碳源、氮源、水和无机盐，其中琼脂作为凝固剂（物理上分该培养基为固体培养基），尿素是唯一的氮源，葡萄糖提供碳源。

【提问】那么从什么样的环境中取土样更容易获得尿素分解菌呢？

【学生】思考讨论后推测在尿素含量高的环境中更容易获得尿素分解菌。

【教师】同学们的推测很好，前面课本中就提到在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。如耐热细菌要到热的环境中寻找，耐盐细菌要到盐含量高的环境中寻找等等。所以分解尿素的细菌要到尿素含量较高的环境中寻找。什么地方尿素含量高呢？

【学生】尿多的地方

【教师】很好，我们可以人为制造尿素含量高的环境，比如在土壤中撒尿过一天或者两天来取样。请同学们想想分离土壤中分解尿素的细菌的分离其操作流程应该怎样？要的得到纯净的尿素分解菌应该要注意哪些方面的问题？

【学生】分组讨论并写下实验流程

【教师】引导学生交流他们的实验流程，最终归纳出配制选择培养基→土壤取样→样品稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的选择培养基上→挑选能生长的微生物菌落继续培养在以尿素为唯一氮源的培养基中→加入酚红指示剂初步鉴定分离出分解尿素的细菌。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。因此通过检测培养基pH的变化来判断该化学反应是否发生。一般通过加入酚红指示剂看到红色来判断尿素分解菌的存在，从功能上讲该培养基为鉴别培养基。

【提问】如何判断土样中尿素分解菌的多少呢？

【学生】通过计数

【教师】计数方法是什么？大家都知道细菌很小我们的肉眼不看到单个个体，那用哪些方法可以对其计数呢？

【学生】阅读教材22页内容和25页旁兰内容

【教师】引导得出微生物计数常用的方法：稀释涂布平板法、显微镜直接计数法、滤膜法等。

比较三种方法，其中稀释涂布平板法是通过统计菌落数目来估计细菌数目，该方法得到的数值比真实值会偏低，为了能使数据更接近真实值一般要涂布3个或者3个以上的平板求平均值，此外样品要稀释到平板上菌落数为30~300个时要更准确，其计数公式为菌株数=（平板上生长的平均菌落数÷涂布平板时所用的稀释液体积）×稀释倍数，例子用课本图2-7来讲；滤膜法统计的也是菌落数；显微镜直接计数法类似于前面讲过的血细胞计数板计数法，其统计的数据中死细菌和活细菌都计数，得到的数值更接近真实值。在用稀释涂布平板法计数时，为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度一般要设置对照实验（接种无菌水的一组空白对照）和重复实验（至少3组），判断是否被杂菌污染时，观察空白对照组上是否长出菌落，或观察实验组中是否出现了不同形状，颜色和大小等的菌落来判断。为了防止杂菌的污染要严格无菌操作。此外在实验中我们还需要注意什么问题。

【学生】阅读教材操作提示

【巩固练习】完成课后练习及资料练习

【板书】课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、尿素分解的反应式：

二、实验室筛选菌株的原理

三、从土壤中分离分解尿素的细菌的一般步骤

四、微生物计数的方法

【教学反思】在本节中，教学内容相对较多所以怎样安排教学使得学习变得容易些、愉快些、有效些就成为教学设计的关键，在教学过程中我将课本内容的顺序进行了适当的调换越高了知识点之间的关联性，也提高了逻辑推理的能力。此外，通过问题引导和学生的分组讨论，让知识点层层深入且激发了学生的学习积极性。但是本课题涉及的实验操作在我们的学校条件中无法满足，所以只有理论知识讲解，而无学生实际的实验操作有的问题学生还是存在困惑变成死记知识。