走近生物技术教学实录

充分会使DNA的提取量减少，影响实验结果，导致得不到丝状沉淀物。

21．用二苯胺鉴定DNA，在沸水浴的条件下呈现蓝色。

22．目前常用的加酶洗衣粉的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

23．探究加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤效果的实验自变量是洗衣粉的种类；探究加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件实验的自变量是水的温度。

24．一般来说，酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

25．酵母细胞固定化的步骤：酵母菌的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合→固定化酵母细胞。

26．如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。

三、易错辨析

1、兼性厌氧与“有氧、无氧”都一样

2、酿酒和酿醋所利用的微生物类型相同

3、腐乳前期发酵和后期发酵的作用

4、腐乳制作中食盐的作用只是调节风味

5、影响腐乳口味的因素有哪些

6、选择培养基和鉴别培养基

7、平板冷凝后，不明确平板倒置的目的

8、影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素

9、酵母细胞固定化实验中，海藻酸钠和氯化钙的作用

10、DNA粗提取和鉴定实验中，两次使用蒸馏水的作用

11、破碎动植物细胞的方法

四、重点突破

(1) 传统发酵技术和微生物的利用

1．传统发酵技术的应用(填图) (1)果酒和果醋的制作：

(2)腐乳的制作：

①制作原理：

②实验流程及影响因素：

2．图解识记微生物的培养、分离与计数(填图)

(2) 酶的应用和DNA的粗提取与鉴定

1．图解酶的应用与固定化(填图)

2．DNA粗提取与鉴定(填图)

五、变式训练

1．某高校采用右图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究，下列叙述错误的是(

) A．夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理

B．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大

C．正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压

D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵

2．(多选)如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是(

) A．改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响

B．果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸

C．果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关

D．气体入口与气体出口可以交换使用

3．(多选)下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述，错误的是(

) A．高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓

B．选择培养基可以鉴定某种微生物的种类

C．待培养基冷却至室温时倒平板

D．统计样品中活菌数量时，接种方法可采用稀释涂布平板法

4．(多选)漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是(

)

A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化

D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

5．(多选)下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是(

) A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来

B．洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解

C．在50 ℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活

D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性

6．人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是________(填序号)。

①酒精灯

②培养皿

③显微镜

④无菌水

(2)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是______________ _________________________________________________。

(3)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是________________________________________________________________________ ________________________。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。图中降解圈大小与纤维素酶的____________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是______(填图中序号)。

(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株________更适合用于人工瘤胃发酵，理由是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

7．酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的________，及时对培养基进行分装，并进行____________灭菌。

(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。

(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有________。

a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌

b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量

d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中9格中的细胞数，理论上________色细胞的个数应不少于________，才能达到每毫升3×10个活细胞的预期密度。