课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教学设计说课稿

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（2课时）

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【学习目标】1.说出培养基对微生物的选择作用，理解并记忆进行微生物数量的测定的方法；

2.记忆利用选择培养基分离细菌的详细步骤

【知识链接】尿素[CO(NH2)2]最初是从人的尿液中发现的，后来也是人工合成的第一个有机物，广泛存在于自然界中。尿素是一种有机态氮肥，经过土壤中细菌将尿素分解成氨之后才能被植物吸收利用。

【新知预习】一、研究思路1．筛选菌株[来源:Z,xx,k.Com][来源学科网]

尿素是一种重要的氮肥，农作物________直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为________和CO2，才能被植物利用，这是因为土壤中的这些细菌能合成________。因此，利用这一特点，可以将这些细菌从土壤中筛选出来。

(1)实验室中微生物的筛选的原理：人为提供有利于________生长的条件(包括营养、________、pH等)，同时________或________其他微生物生长。

(2)选择培养基：在微生物学中，将允许________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

2．统计菌落数目

常用来统计样品中活菌数目的方法是______________。当样品的________足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中________。通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数。这种方法统计的菌落数比活菌的实际数目________。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是________个菌落。因此，统计结果一般用________而不是活菌数来表示。除此之外，________________也是测定微生物数量的常用方法。

3．设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中________________________________________对实验结果的影响，提高实验结果的________。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养该种生物的________培养基作为空白对照。

对照实验是指除了________的条件外，其他条件都____ ____的实验。

二、实验设计

包括对_______________、所需仪器、材料、用具和药品、___________________________及时间安排等的综合考虑和安排。关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：

1．土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。应先铲去________3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的________中。

2．样品的稀释

样品的__________将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通常选用____________的样品液进行培养，以保证获得菌落数在____________之间、适合于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用______________的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍的稀释；测定真菌的数量，一般选用______________倍的稀释。如果是第一次做这个实验，可以将稀释范围_________________。如可以将103～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在______________间的平板进行计数。

3．微生物的培养与观察

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在________°C培养1～2 d，放线菌一般在25～28 °C培养5～7 d，霉菌一般在________°C的温度下培养3～4 d。在菌落计数时，每隔________h统计一次菌落数目。选取__________时的记录作为结果，以防止因________不足而导致遗漏菌落的数目。

一般来说，在________的培养条件下(相同的________、温度及________)，同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括________、大小、________、颜色等方面。

思考：

为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

三、对分离得到的分解尿素的细菌的鉴定

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_________________将尿素分解成了________。氨会使培养基的碱性________，pH________。因此，我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反 应是否发生。在以________为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果pH________，指示剂将变________，说明该细菌能够分解尿素。