课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教学设计

高二生物学案

专题二第2节 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

2. 一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为 。因此，统计结果一般用 而不是活菌数来表示。

学习目标 1．利用选择培养基分离细菌。

2．运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数的问题。

学习重点

1．对土样的选取和选择培养基的配制。

2．对分解尿素的细菌的计数。

学法指导

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性。

知识梳理

一、筛选菌株

1．尿素只有被 分解成 之后，才能被植物吸收利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成___________。

2．以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：

⑴ ；⑵ 。

3．PCR（ ）是一种在体外将 。此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。科学家最终是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现耐热菌种，并从中分离出这种酶的。这说明，在寻找目的菌株时，要根据它对__________的要求，到______________去寻找。

3.每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表__________________________，V代表___________ ______________，M代表_______________。

4．除此之外， ______________也是测定微生物数量的常用方法。

5.设置对照的目的是排除实验组中______________对实验结果的影响，提高实验结果的__________。

6．对照实验是指除了 以外，其他条件都 的实验，其作用是 ，排除_______________的干扰，证明确实是__________________引起相应的结果。

三、实验设计

1．实验设计包括对 ，______ 、 、 和 ，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。

2.在富含有机质的土壤______，有更多的微生物生长。土壤中的微生物，大约70%--90%是_______。细菌适宜在酸碱度___________的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距离地表约____________的土壤层。

3._________________直接影响平板上生长的______________。实际操作中，通常选用_____________的样品液进行培养，以保证获得适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用____________倍的稀释液进行培养；测定放线菌的数量，一般选用_____________倍稀释；测定真菌的数量，一般选用_____________倍稀释。

4．不同种类的微生物，往往需要不同的培养 和培养 。在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因 4．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于

生长的条件（包括 不足而导致 。

等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

5.菌落的特征包括__________、______、___________和________等方面，菌落的特征可以作为区分5．选择培养基是指 。

不同菌种的依据。

二、统计菌落数目

四、操作提示

1．常用来统计样品中活菌数目的方法是 。即当样品的稀释度足够高时，培养基1．无菌操作应注意以下几个问题：

表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样⑴取土样用的小铁铲和盛土样的信封使用前都需要 。

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⑵应在 称取土壤。在火焰附近称好的土样倒入锥形瓶，塞好 。

⑶在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在______________操作。

2．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是 ______________ 。标记培养皿时，标记的内容包括_____________、_____________以及平板上培养样品的__________等。

3．对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行一步的鉴定，还需要借助 的方法。

4．在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____，会让培养基________, _________，因此可以通过检测培养基______________来判断该反应是否发生。在以_______为唯一氮源的培养基中加入___________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将________。

自主测评

1.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )

A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂

B.以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂

C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂

D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

2.关于微生物的培养,下列叙述错误的是( ) A.细菌一般在30~37 ℃的温度下培养1~2 d B.放线菌一般在25~28 ℃的温度下培养5~7 d C.霉菌一般在25~28 ℃的温度下培养3~4 d D.不同种类的微生物,一般需要相同的培养温度和培养时间

3.在培养基中加入尿素(唯一氮源),以分离出能分解尿素的细菌,这种加入尿素的培养基在功能上属于( ) A.选择培养基 B.固体培养基 C.液体培养基 D.半固体培养基

4.需要在火焰旁操作的有( ) ①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养

A.①②③④⑤ B.②③④⑤ C.③④⑤ D.②③④

5.以下关于分解尿素的细菌的说法,正确的是( ) A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶

B.以尿素作为唯一的碳源

C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性

D.以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红

6.稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为70%的酒精中,取出后又要放在酒精灯火焰上引燃,这两步分别属于什么技术?( ) A.灭菌、灭菌 B.消毒、消毒 C.灭菌、消毒 D.消毒、灭菌

7.通常用来作为菌种鉴定的重要依据是( ) A.菌落 B.细菌形态 C.细菌体积 D.细菌结构

8.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是( ) A.微生物培养前,需对培养基进行消毒

B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法

C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度

D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源

9.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天,结果如下图所示。从实验结果分析,以下叙述不正确的是( ) A.链霉素能阻止结核菌的生长

B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效

D.链霉素可以用于治疗伤寒病人

10.下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法,错误的是( ) A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离

B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同

C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数

D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

11. 某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到了能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。请分析回答下列问题。

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_____________________,这种培养基属于______培养基。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________,实验需要振荡培养,由此推高二生物学案(土壤中分解尿素的细菌的分离与计数)

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。

A含量___________的培养液,接入新的培养液中连续培养,,通过____________法对“目的________________的平板进行计数。

_________________处理后,才能倒掉。

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共2页测“目的菌”的代谢类型是_____________(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物使“目的菌”的数量__________。

(4)可采用____________的方法将“目的菌”接种到固体培养基上菌”的数量进行统计,通常需要对菌落数为(5)实验结束时,使用过的培养基应该进行