课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt课件课堂实录

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

【课标要求】1、研究培养基对微生物的选择作用。2、进行微生物数量的测定。

【课标分解】1、研究培养基对微生物的选择作用。2、进行微生物数量的测定。

【学习过程】 一、温故默写（5分钟内完成）：

（一）培养基

1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。

2．营养构成：各种培养基一般都含有

、

、 和 ，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 （二）无菌技术 1、获得纯净培养物的关键是 。

2、消毒和灭菌

（1）消毒常用的方法有： 、 、 消毒法。

（2）灭菌常用的方法有： 、 、 灭菌。

（三）实验操作----大肠杆菌的纯化培养

1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：

、

、

、

、

。

2、纯化大肠杆菌

微生物接种：最常用的是 法和 法。

二、新课学习

（一）研究思路

1．筛选菌株

(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

【同步例题】

例1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 1

例2、分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答：

(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别 和 。

(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?答： 。

如果具有，又是如何进行选择的? 答 。

2．统计菌落数目

（1）测定微生物数量的常用方法有 和 。

（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理

当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

【同步例题】

例3、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为10的培养基中．得到以下几种

统计结果，正确的是 ( ) A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和2墨6，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233 例4、某同学在稀释倍数为10的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) ( ) A．2.34×10 B．2.34×10 C．234 D．23.4 3．设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的 。

【同步例题】

例5、用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 D．接种了的选择培养基

例6、在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

68966： 2

A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④

（二）实验设计

关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：

1． 取样：

2．制备 ：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基

将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为 ，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。

3．样品的稀释

4．微生物的 与观察

5．细菌的计数

当菌落数目稳定时，选取菌落数在 的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。

【同步例题】

例7、下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是 ( ) ①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1mL进行平板涂布 ④依次稀释至10、10、10、10、10、10、10稀释度

A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③ D．①→④→②→③

例8、下列操作需要在火焰旁进行的一组是( ) ①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养

A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④

（三）课题延伸：鉴定分解尿素的细菌（P26）

例9、下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ）

A．以尿素为唯一氮源的培养基中加人酚红指示剂 B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

【巩固训练】

1、用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（ ）

A. 比实际值高 B. 比实际值低 C. 和实际值一致 D. 比实际值可能高也可能低

2、下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是 ( ) A．一般选用10～10倍的稀液分别涂布

B．测定放线菌的数量，一般选用10、lO和10倍稀释

3 453712345673

C．测定真菌的数量，一般选用10、10和10倍稀释

D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将10～10倍的稀释液分别涂布到平板上培养

3、下列关于微生物的培养叙述错误的是( ) A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2 d B．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7 d C．霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4 d D．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数——答案

一、温故默写

（一）1.营养物质 生长繁殖 2.水 碳源 氮源 无机盐 pH 特殊营养物质 氧气

（二）1、防止外来杂菌的入侵 2、（1）煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 （2）

灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸气

（三）1、计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 2、平板划线 稀释涂布平板

二、新课学习

（一）研究思路

1、（1）目的菌珠 抑制 阻止 （2）特定 抑制 阻止

【同步例题】例1、A 例2、(1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是唯一氮源，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2、(1)有稀释涂布平板法 显微镜直接计数 (2)稀释度 细菌 30-300 【同步例题】 例3、D 例4、B 3、非测试因素 可信度 【同步例题】例5、C 例6、A （二）实验设计

1、

土壤 2、培养基 多于 对照 4、培养 5、30-300 平均值

【同步例题】例7、C 例8、D （二）实验设计

【同步例题】例9、A 【巩固训练】1B 2C 3D

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