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课题3　血红蛋白的提取和分离名师教学设计2｜教案在线预览

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关键词：课题3　血红蛋白�…名师教学设计2

正文

课题3 血红蛋白的提取和分离

第一课时

备课人

张爱雨

学习目标：

本课题尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法，电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习运用这些技术打下基础。

重难点：

凝胶色谱法的原理和方法，样品的预处理

色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

导入：DNA粗提取知识回顾

提取（分离）生物大分子的基本思路：

DNA粗提取的原理：利用

与

、

和

等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

自主学习：

蛋白质分离和提取的原理：

一、凝胶色谱法

1、凝胶：

2、概念：也称做

；是根据

分离蛋白质的有效方法。

3、原理：

（1）由

构成的凝胶，内部有许多贯穿的

。

（2）当

不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量

的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程

，移动速度

，而相对分子质量

的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在

移动，路程

，移动速度

，从而使

不同的蛋白质分子得以分离。

即：相对分子质量较大的蛋白质

通过多孔凝胶颗粒的间隙

路程短

、流动快

先从层析柱洗脱出来

学以致用：

例1 利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来（）

A. 相对分子质量大的

B. 溶解度高的

C. 相对分子量小的

D. 所代电荷多的

例2用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（）

A路程较长，移动速度较慢 B路程较长，移动速度较快

C路程较短，移动速度较慢 D路程较短，移动速度较快

例3、凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（

）

A. 对其他分子的亲和力

B. 溶解度

C. 所带电荷多少

D. 相对分子质量的大小

例4、凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是（

）

A. 糖类化合物

B. 脂质

C. 蛋白质

D. 核酸

二、缓冲溶液

1、作用：在一定范围内，抵制

的

对溶液pH的影响，维持pH

。

2、配制：由

种缓冲剂溶解于

中配制而成，通过调节缓冲剂的

就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。

思考：

3、人体血液中的缓冲物质？

学以致用：

例5、下面说法不正确的是

(

) A、在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变

B、缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成

C、电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

D、透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内

三、电泳

1、概念：指

在电场的作用下发生

的过程。

2、原理：

在一定的

下，

、

等生物大分子的可解离基团会带上

或

在

的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷

的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子

的差异及分子本身的

、

的不同，使带电分子产生不同的

，从而实现样品中

的分离。

3、方法：常用的电泳方法有

和

。

测定蛋白质分子量时通常使用

。

4、SDS—聚丙烯酰胺凝胶

应用：

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速率取决于：

SDS作用：

SDS测试结果是：

蛋白质在SDS—聚丙烯酰胺凝胶的迁移速率取决于：

学以致用：

例6、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是

(

) A、蛋白质分子所带的电荷

B、蛋白质分子的形状

C、蛋白质分子的相对分子质量

D、缓冲溶液的pH

资料摘要

课题3　血红蛋白的提取和分离名师教学设计2