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专题5 DNA与蛋白质技术课题5.3 血红蛋白的提取和分离(第一课时)一、【学习目标】1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白。2、说出色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。二、【学习重难点】凝胶色谱法的原理和方法三、【教学方法】启发式教学四、【教学工具】多媒体课件五、【教学过程】(一)引入新课蛋白质

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课题3 血红蛋白的提取和分离优秀教学实录

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课题3 血红蛋白的提取和分离优秀教学实录

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关键词:课题3 血红蛋白�…优秀教学实录

正文

专题5

DNA与蛋白质技术

课题5.3

血红蛋白的提取和分离(第一课时)

一、【学习目标】

1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白。

2、说出色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

二、【学习重难点】

凝胶色谱法的原理和方法

三、【教学方法】

启发式教学

四、【教学工具】

多媒体课件

五、【教学过程】

(一)引入新课

蛋白质是生命活动的主要承担者,是细胞内含量最高的有机化合物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。回顾蛋白质相关知识,引入新课。

1、含量:占细胞干重的50%以上,是细胞中含量最多的有机化合物。

2、组成元素:C、H、O、N(主要)

3、基本单位:氨基酸

4、分子结构:高分子化合物

5、介绍血红蛋白(作用、分子组成)

(二)进行新课

活动一:阅读课本,思考下列问题:

1.蛋白质的分离和提取的原理是什么?提取分离方法?

2.凝胶色谱法的概念?凝胶色谱法的原理?

3.缓冲溶液的概念、作用?组成?

4.凝胶电泳法的原理?

5.聚丙稀酰胺凝胶电泳原理?SDS作用?

活动二:小组讨论,解决问题

活动三:学生展示,回答问题

1蛋白质提取与分离的依据——蛋白质的物理化学性质差异

蛋白质的理化性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离各种蛋白质。

2..凝胶色谱法(分配色谱法):

(1)原理:(图5-13a)分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。

(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。

(3)分离过程:

*洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。

总结比较:

3.缓冲溶液

(1)原理:由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成(如H2CO3-NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等),调节酸和盐的用量,可配制不同pH的缓冲液。

(2)缓冲液作用:抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

4.凝胶电泳法:

(1)原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

总结比较:

(2)分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

(3)分离过程:在一定pH下,使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

活动四:师生共同总结

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