复习与测试优秀说课稿

微生物的培养与应用

1.请回答下列相关问题：

(1)配制培养基时加入的乳糖属于培养基成分中的_______。对培养基进行灭菌时，一般使用__________(填仪器名称)。灭菌后，待冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近_______。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于_______培养基。

(2)在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________。

(3)检测大肠杆菌含量时，将1 mL河水样品稀释10倍，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的黑色菌落数分别为62、65和68。据此可得出每升样品中的活菌数为_______个。

(4)该小组通过统计菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比实际值________(填“偏高”或“偏低”)，理由是__________ __________________。

2.莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答：(已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明) 世纪金榜导学号

(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为_______，目的是__________ __________________。

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(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行_______，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和_______法，从图中看本实验采用的是_______ (填“前者”或“后者”)。

(3)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们筛选的目的菌是菌落中_________的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来自_______。

(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？______________________________________________________________ ___________________________________________________________________。

3.水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以________为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显________(填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用_________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌_______个。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外，还需要加入_______用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌- 2 -

株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定___________________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

4.蚯蚓常以土壤中的秸秆和微生物为食，研究表明蚯蚓能通过分泌体液或者消化液影响微生物的生命活动。为探究蚯蚓肠液和体表分泌液对纤维素分解菌存活情况的影响，研究小组进行如下实验。回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌可以用_______法。根据透明圈的大小可以鉴别纤维素分解菌分解纤维素的能力，其原理是_____________________________ ___________________________。

(2)补充以下实验步骤：

①提取蚯蚓的肠液和体表分泌液，在-18 ℃环境中保存；

②分别取等体积肠液和体表分泌液与1 μL稀释培养的__________混合；

③对照组应设置为___________________________________________________ ____________________________。

④在18～20 ℃培养2 h后，采用_______法制作平板，将各组平板置于相同且适宜的条件下培养一段时间；

⑤______________________________________________。

5.如图表示分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的简要过程，回答下列问题：

(1)将土壤表层泥土稀释液煮沸15 min后获得的样品中，仍含有一些活的菌种，原因是_______________。

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(2)图中将菌种接种到平板1的方法是__________；将菌种接种到平板2之前，接种工具常用_______法进行灭菌。为了逐步分离、纯化得到目的菌种，平板1和平板2中的培养类型都应该属于_______培养基。对于频繁使用的菌种可接种到题图试管中的_______培养基上临时保藏。

(3)用稀释涂布平板法在5个平板上都接种稀释倍数为104的样品液0.1 mL，培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为182、160、168、175和190，据此推测，每毫升样品液中的细菌数量为_______个。稀释涂布平板法能够通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数目，原因是________________________ ____________________________。

6.为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离和培养等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。将1 mL水样稀释1 000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为_______个。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_______灭菌，为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落，在第二次及以后的划线时，一定要__________，示意图A和B中，_______表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。通常，对获得的纯菌种可以依据__________对细菌进行初步的鉴定和分类。

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(3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_______的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_______的利用率。

7.Ag/TiO2作为一种常见的半导体光催化剂，在可见光照射下不仅可杀灭饮用水中的细菌等微生物，降解水中的有机化合物，还能循环利用，因此被广泛使用。某研究小组制备了Ag/TiO2

空心微球，现欲探究不同载银量的Ag/TiO2

空心微球的杀菌性能。请回答：

(1)培养大肠杆菌：制备适宜大肠杆菌生长的培养基，将培养皿、培养基等置于_________中灭菌20 min；在无菌环境中倒平板，待平板冷凝后，将平板倒置，是为了___________________。将大肠杆菌制备成菌悬液，分离纯化。

(2)杀菌性能检测：挑取菌落制成菌悬液，用_______(工具)接种于无菌平板表面，使其均匀生长，布满平板；用浸透了___________________的小滤纸片(实验组)和浸透了_______的小滤纸片(空白对照)，分别放在涂好菌的平板的不同位置；将平板置于恒温箱中培养一段时间，观察记录_____________________ _____________。

(3)测定饮用水所含的大肠杆菌数目，还有一种特别的方法：将已知体积的饮用水过滤后，将_______放在加入_______的培养基上(大肠杆菌菌落呈黑色)，根据黑色菌落的数目，可计算出水样中大肠杆菌的数量。

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