资料摘要

多聚酶链式反应扩增DNA片段[教学目标] (一)知识与技能1、了解PCR技术的基本操作2、理解PCR的原理3、讨论PCR的应用(二)过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中,应避免外源DNA污染,严格控制温度等反应条件(三)情感、态度与价值观通过对PCR实验的操作及结果分析,培养学生严谨

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课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段教学实录与评析

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关键词:课题2 多聚酶链�…教学实录与评析

正文

多聚酶链式反应扩增DNA片段

[教学目标] (一)知识与技能

1、了解PCR技术的基本操作

2、理解PCR的原理

3、讨论PCR的应用

(二)过程与方法

在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中,应避免外源DNA污染,严格控制温度等反应条件

(三)情感、态度与价值观

通过对PCR实验的操作及结果分析,培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神

[教学重点]

PC R的原理和PCR的基本操作

[教学难点]

PCR的原理

[教学过程] (一)引入新课

多利羊,大家还记得吗?

今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。

(二)进行新课

基础知识

PCR技术扩增DNA的过程,其实就是模拟自然情况下,细胞内DNA的复制。

所以PCR技术扩增DNA的过程与细胞内DNA复制过程类似。

回顾细胞内DNA复制过程,推出细胞内DNA复制的条件

PCR原理

PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合,现在使用的PCR仪实质上也是一台能够自动调控温度的仪器

耐高温的Taq DNA聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题,促成了PCR技术的自动化

细胞内和细胞外DNA复制环境的区别(表格)

细胞内复制和PCR不同点(表格)

PCR的反应过程

PCR一般经历三十多次循环,每次循环可以分为三个基本步骤──变性、复性和延伸

循环过程

①变性(模板DNA解旋)

②复性(退火)

③延伸

第1个

PCR 循环完成后

:得到两个拷贝的靶序列

PCR 循环的结果

①从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸

②

DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增

PCR 的实验操作(条件限制,观看视频代替)

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