资料摘要
《多聚酶链式反应扩增DNA片段》教学设计教学目标（一）知识与技能1.了解PCR技术的基本操作2.理解PCR的原理3.讨论PCR的应用（二）过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件（三）情感、态度与价值观 通过对PCR实验的操作及结果分析
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课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段教案及板书设计
未知
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关键词：课题2 多聚酶链�…教案及板书设计
正文
《多聚酶链式反应扩增DNA片段》教学设计
教学目标
（一）知识与技能
1.了解PCR技术的基本操作
2.理解PCR的原理
3.讨论PCR的应用
（二）过程与方法
在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件
（三）情感、态度与价值观
通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神
教学重难点
重点：PCR的原理和PCR的基本操作
难点：PCR的原理
教学过程
（一）引入新课
科技不断发展，在人文经济社会，很多考古生物检定，案件调查、基因诊断、人类基因组计划等都离不开DNA技术，在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。那么怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。
（二）进行新课
1.1 细胞内DNA复制条件分析：
条件
组分
作用
模板
DNA的两条单链
提供复制的模板
原料
四种脱氧核苷酸
合成DNA子链的原料
酶
解旋酶
打开DNA双螺旋
DNA聚合酶 催化合成DNA子链
能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能
引物
RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点
1.2 PCR技术： （1）概念：教材58页 一种体外迅速扩增DNA片段的技术
（2）原理：利用热变形原理进行体外DNA复制
（3）前提：一段已知目的基因的核苷酸序列
（4）原料：模板DNA DNA引物（DNA 或RNA ，5’-3’） 四种脱氧核苷酸 热稳定DNA聚合酶（Taq 酶）
（5）条件：高温（自动调控温度的仪器） 缓冲溶液（注：类似核基质，为DNA复制提供场所）
（6）过程：(三部曲) A.变性(90--95℃) （30s）解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。
注意：温度过高，影响酶活性，时间太长，使酶钝化；温度过低，解旋不完全，不能达到
扩增目的
B.退火（55-60℃） 55℃
引物结合：引物通过碱基互补配对与两条单链DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。
C.延伸（70-75℃）72℃
DNA聚合酶结合：
子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。
后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链）
子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。
（三）课后作业
复习基础知识并比较PCR技术扩增DNA的过程与细胞内DNA复制过程，从以下几个方面去分析：
不同点：产物、温度、解旋方式、引物、复制特点
相同点：聚合方向、模板、原料、原则、复制特点
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关于本教案的常见问题
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