复习与测试优质教案设计

选修一

生物技术实践

第1讲

微生物的培养和利用

1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时

(

) ①可以用相同的培养基

②都需要使用接种针进行接种

③都需要在火焰旁进行接种

④都可以用来计数活菌

A．①②

C．①③

B．③④

D．②④

解析

平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

答案

C 2．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是

A．植物组织培养常用的是固体培养基

B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌

D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌

解析

在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。

答案

D 3．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是

．(

) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时

D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数

(

)

解析

检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行计数。

答案

D 4．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是

A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 解析

在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。

答案

D 5．如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O 葡萄糖

尿素

琼脂

自来水

请根据以上配方，回答下列问题。

(1)该培养基含有微生物所需要的________类营养物质。其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

(2)该培养基按物理性质划分是________培养基；按培养基的作用划分是选择培养1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至1 000 mL

(

)

基，该培养基具有选择作用的原因是____、____________。

(3)在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是________________________________________________________。

(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入________指示剂，尿素被分解后指示剂变________色。

(5)某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是________，添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供_________________________。

答案

(1)4 (2)固体

该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖

(3)在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高

(4)酚红

红

(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌进行无氧呼吸产生酒精)

所需的各种营养物质(或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子) 6．在日常生活中，一提到细菌、真菌及病毒这些微生物，人们往往首先想到它们的害处，其实，很多微生物对人类是有益的，它们与我们人类的关系非常密切，而且人类已经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。

(1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序：配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

①采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是________________________。

②若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？________，原因是______________________________________。

(2)在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的________，________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌，经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌的常用方法有________和________。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、________。

解析

(1)采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是灭菌；若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌不能将酒精转变成醋酸，原因是醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长。(2)在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

答案

(1)①灭菌

②不能

醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长

(2)毛霉

肽和氨基酸

脂肪酶

(3)平板划线法

稀释涂布平板法

无机盐、碳源、氮源

7．纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。回答下列问题：

(1)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于(

) A．③

C．②③

B．①②

D．①②③

(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是______________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。

(3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________。若探究纤维素酶活性的最适温度，

如何设置对照？___________________________________。

解析

(1)刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成，则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

(2)牛胃是一个厌氧的环境，所以其中的纤维素分解菌与需氧的醋酸菌培养条件有所不同。因是活菌计数法，所以部分死亡菌无法计数。另外当两个或多个细菌连在一起时平板上只观察到一个菌落，所以偏小。

(3)探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照，其他无关变量要适宜。

答案

(1)刚果红

A

(2)保证无氧环境

小(低) (3)缓冲溶液

不同的温度梯度之间相互对照