课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第二课时教学设计

《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计

课题

考点、

知识点

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课时

1 授课班级

2019级

筛选的原理：分离：计数

（一）知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

（二）过程与方法

教学目标

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

（三）情感、态度与价值观

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制

重、难点

教学难点：对分解尿素的细菌的计数

教学过程

教学内容

引入新课

上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

一．基础知识

1．1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

氨和CO2

，这是因为细菌能合成

脲酶

。

1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为

热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物

，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。

二.

筛选菌株

提问:生物与环境之间的关系?

生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用

学生活动

复习微生物培养的基础知识

（回忆)

学生阅读课题背景交流表述尿素的特

特殊的培养基能筛选出特殊的微生物吗? 点及作用

本课题实验使用的培养基的特点与功能是什么呢?

三. 统计菌落数目

1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是

稀释涂布平板法

。除此之外，

显微镜直接计数

也是测定微生物数量的常用方法。

提问：为什么是活菌数? 怎么计算? 在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。

公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量

1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于

样品稀释液中一个活菌

。通过统计

平板上的菌落数

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在

30～300 的平板进行计数。

阅读筛选菌株,思考问题,回答.

四.设置对照

阅读后思1.怎么设置对照说明培养基是无菌的? 考回答问题

2. 怎么设置对照说明培养基发挥了选择功能?

3. 怎么设置对照说明菌落数是有效的?

五.实验设计:

1.有哪些重要环节?

分析思考取样

稀释

涂平板

培养与观察

计数

鉴定

和回答.

2.各环节需要哪些工具?

1.

操作时注意的问题?

土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％

为细菌。

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。

取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

1）应在火焰旁称取土壤

10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

2）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

3）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

4)为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

阅读

分析思考和回答.

4.怎么鉴定?

阅读

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成NH3，NH3会使培养基的碱性增强，pH升高。因此，通过检测培养基pH的变化来判断该化学反应是否发生。

分析思考和回答

总结：

人为

土壤

分离筛选微生物的原理

条件

中尿

素分

解菌微生物计数方法与原理

的分

对照设置与重复设置

离与

计数实验方案

实验设计

课堂练习

有利于目的菌株生长

抑制或阻止其他微生物生长

稀释涂布平板法

显微镜直接计数

引导学生实验操作

结果与分析

归纳记忆

1.利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的常用菌种分别是

A．酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 B．酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌 C．酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 D．黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌

2．下列操作不属于微生物的分离步骤的是

A．

稀释 B．划线或涂布 C．接斜面 D．培养

3．影响微生物生长的主要环境因素是

A．阳光、温度、水分 B．温度、水分、PH C．水分、PH、氧 D．温度、PH、氧

4.下列微生物的产物中没有菌种特异性的一组是

A．氨基酸、核苷酸、多糖、色素 B. 多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸

C．核苷酸、多糖、维生素、毒素、抗生素 D．核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸

5．微生物代谢的人工控制是指

A.改变微生物的遗传特性 B.控制发酵时的温度

C.调节发酵过程中的pH，氧气通入量 D.包括A、B、C三项

课堂练习