课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第二课时教学实录

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

【目标学习】

1.通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用，理解筛选微生物的原理。2.结合实验设计，分析微生物数量测定实验中产生偏差的原因及解决措施，学会微生物的计数方法，并对培养结果进行分析和评价。

【重点难点】

1.研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。

2.能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数问题。

第一课时

【先学自研】

一、研究培养基对微生物的选择作用

1.筛选菌株

(1)自然界中目的菌株的筛选

①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。

(2)实验室中目的菌株的筛选

①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。

②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。

③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。

2.选择培养基

(1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。

【互动探究】

1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基

下面是本课题使用的培养基的配方，请分析：

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O 葡萄糖

尿素

琼脂

1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL

(1)在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？

答案

碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的？

答案

该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。

(3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？

答案

分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。

2.设计对照实验

(1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌？

答案

增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。

(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染？

答案

设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。

归纳总结

选择培养基的分类

1利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。

2利用化学物质进行的选择培养：在完全培养基中加入某些化学物质，利用加入的化学物质抑制某些微生物的生长，同时选择所需的微生物。

3利用培养条件进行的选择培养：改变微生物的培养条件如高温、特殊pH等，筛选特定微生物。

【训练内化】

1.下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是(

) A.用全营养牛肉膏蛋白胨培养基筛选大肠杆菌

B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株

C.含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株

D.利用高温条件筛选耐热的Taq细菌

答案

A 2.下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是(

) 编号

成分

含量/g

A.此培养基可用来培养自养型微生物

①

(NH4)2SO4

0.4 ②

KH2PO4

4.0 ③

FeSO4

0.5 ④

CaCl2

0.5 ⑤

H2O 100 mL

B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源

C.若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌

D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子

答案

C 技巧链接

选择培养基的常见类型

(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。

(2)常见的选择培养基

①加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。

②加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。

③无氮源培养基可以分离固氮微生物。

④以石油为唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微生物。

⑤将培养基放在高温环境中培养，可以分离耐高温的微生物。