课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

1.利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

2.分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

3.形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学方法:启发式教学

五、教学工具:多媒体课件

六、教学过程

（一）展示评价导学案

1.学生中存在的问题；

2、教师强调：

1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤

中的细菌将尿素分解为氨和CO2 ，这是因为细菌能合成脲酶。

2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，

这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

3.生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养

条件等选择目的微生物。

（二）导引探究：

〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是

，提供氮源的

是

，琼脂的作用是

。

〖思考2〗该培养基对微生物

（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是

。

1在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是

。除

此之外，

也是测定微生物数量的常用方法。

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。

公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量

采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300 的平板进行计数。

〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是

（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

三、实验流程：

1土壤取样

2制备培养基

3系列稀释

4涂布平板与培养

5.细菌的计数

四、实验中注意事项：

（一）土壤取样：土壤层的3∼8cm处

（二）做好标记

（三）样品稀释

（1）测细菌数：一般用104、105、106稀释液

（2）测放线菌：一般用103、104、105稀释液

（3）测真菌数：一般用102、103、

104稀释液

原则：确保平板上的菌落数在30∼300之间。

四）微生物的培养与观察

1、接种：用适当的稀释液作涂布平板

2、培养：

细菌：

30∼37℃，1∼2d;

放线菌:

25∼28℃, 5∼7d;

霉菌:

25∼28℃, 3∼4d。

3、观察：

a.每24h统计一次菌落数目

b.以“稳定菌落”为观察对象

c.统计的菌落数往往比活菌的实际数目低

五、实验评价与鉴定

鉴别培养基：不影响微生物的生存

酚红培养基：

鉴定分解尿素的细菌

原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→

酚红变红→脲酶阳性

六、练一练

1.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）(

)

A. 2.34×108

B. 2.34×109

C. 234

D. 23.4

2.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（

）

A.比实际值高

B.比实际值低

C.和实际值一致

D.比实际值可能高也可能低

3、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是

（

）

A. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水

C. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、

尿素、琼脂、水

D. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水