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专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离(第一课时)四川省峨边中学 罗燕一、教学目标1、知识目标:(1)掌握从血液中提取和分离血红蛋白的方法;(2)了解色谱法分离生物大分子的基本原理。2、能力目标:体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤。3、情感、态度
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课题3 血红蛋白的提取和分离教案设计(一等奖)
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专题5 DNA和蛋白质技术
课题3 血红蛋白的提取和分离(第一课时)
四川省峨边中学 罗燕
一、教学目标
1、知识目标:(1)掌握从血液中提取和分离血红蛋白的方法;
(2)了解色谱法分离生物大分子的基本原理。
2、能力目标:体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤。
3、情感、态度与价值观:初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神。
二、教学重点、难点
1、重点:样品的处理和凝胶色谱法的原理和方法
2、难点:凝胶色谱法的原理和方法
三、教学方法:启发式教学
四、教学用具:多媒体课件
五、课前准备:略
六、课时安排:1课时
七、教学过程
(一)引入新课:通过对血红蛋白进行简要介绍,提出问题引入新课。
血红蛋白又称血色素,是红细胞的主要组成部分,能与氧结合,运输氧和二氧化碳。血红蛋白含量能很好地反映贫血程度。怎样提取血红蛋白呢?
(二)进行新课
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1.实验设计
1.1知识回顾:血液的成分有哪些?
1.2选择实验材料
你认为鸟类血液和哺乳动物血液中,最好哪种血液来提取血红蛋白?为什么?
哺乳动物血液。因为该细胞中没有细胞核,血红蛋白含量高。
1.3从红细胞中分离出血红蛋白的过程为:洗涤红细胞、释放血红蛋白、分离血红蛋白、透析。
①洗涤红细胞的目的是什么?
②红细胞的洗涤过程为
血液+柠檬酸钠→低速短时离心→吸出上层血浆→红细胞+5倍体积生理盐水
→缓慢搅拌10min→低速短时离心→吸出上清液→反复洗涤直至上清液无黄色
思考:加入柠檬酸钠有何目的?为什么要低速、短时离心?为什么要缓慢搅拌?
防止血液凝固;防止白细胞沉淀;防止红细胞破裂释放出血红蛋白。
思考:你有什么方法将红细胞中的血红蛋白释放出来?
加入蒸馏水,用玻璃棒快速搅拌一段时间。
1.4如何除去无机盐离子和小分子有机物质呢?—血红蛋白的粗分离
透析。半透膜的选择透过性,大分子物质不能通过半透膜,离子和小分子能够通过半透膜。
总结:通过以上四个基本过程,红细胞中的血红蛋白就被提取出来。但其中还含有其他种类的蛋白质分子(如呼吸酶等)。怎样将杂
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蛋白与血红蛋白分离开来呢?我们来研究蛋白质提取和分离的第二个步骤―血红蛋白的纯化(凝胶色谱法)
2、凝胶色谱法(分配色谱法):
(1)原理:(图5-13a)分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。
(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。
(3)分离过程:
混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子(洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动)
八、板书设计:略
九、课后练习:略
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