课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教学设计

专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

【课题目标】

（一）知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

（二）过程与方法

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

（三）情感、态度与价值观

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

【课题重点】

对土样的选取和选择培养基的配制

【课题难点】

对分解尿素的细菌的计数

【教学方法】

启发式教学

【活动设计】

第一课时：

（一）引入新课

上节课我们学习了培养基的配制以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

（二）进行新课

1.课题背景

1．1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。

反应方程式：

1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包

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括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

学生活动：阅读并分析教材P22旁栏中本课题将使用的培养基配方，思考下列问题。

思考1：在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是_________，提供氮源的的是_________，琼脂的作用是___________。

答案：葡萄糖

尿素

凝固剂

思考2：该培养基对微生物__________（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是___________________________________________。

答案：具有

只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长

教师归纳

选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。除此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。

公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量

1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

思考3：从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是____________________________________________。

答案：（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

思考4：利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是__________________。

答案：恰当的稀释度

思考5：阅读并分析教材P23黑体字内容，回答下面的问题：第_____位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是____________________________________________________________________。

答案：第二位同学

. 第一位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验

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1．5统计的菌落数比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数来表示。

1．6设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

1．7对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。

思考6：根据教材P24页黑体字内容，请分析并设计本实验的对照实验组：

方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。

方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。

（三）课堂小结：略

（四）作业：

1．PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找………( )

A．土壤中 B．海水中 C．热泉中 D．冷库中

2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是………………( ) A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水

B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水

C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水

D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 63.某同学在稀释倍数为10的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)…( )

89 A．2.34×10 B．2.34×10 C．234 D．23.4 64.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( ) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④

5.关于土壤取样的叙述错误的是………( )

A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm左右，再取样

C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D．应在火焰旁称取土壤

6.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 。计数时一般选择菌落数在 的平板计数。

67.在做本课题实验时，一位同学在稀释倍数为10的培养基中涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值?如果需要改进，如何改进? 答案：1．C 2．A 3．B 4．A 5．C

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6．菌落 活菌 30～300 7．不接近真实值，需要重新实验。

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