课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教案案例

水寨中学生物自主探究学案

内容：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

课时：1课时

年级：高二

编号83

教学目标：

知识与技能

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

过程与方法

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

情感、态度与价值观

形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

教学难点

对分解尿素的细菌的计数

教学过程：

研究思路

（一）筛选菌株

1、

尿素是一种重要的氮肥，农作物 （能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 ，这是因为细菌能合成 。

2、科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 ，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是 。

3、选择培养基的概念是 。

思考 在课本P22页的旁栏中使用的培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 ，提供氮源的的是 ，琼脂的作用是 。

思考 该培养基对微生物 （具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是 。

（二）统计菌落数目

1、在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 。除此之外， 也是测定微生物数量的常用方法。

补充 显微镜直接计数是测定微生物的方法。

公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量

2、采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于

。通过统计 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

补充 从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是

（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

。

思考 利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 。

讨论 阅读教材P22页的统计案例进行讨论

第 位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是 。

3、统计的菌落数比活菌的实际数目 。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是 菌落。因此，统计结果一般用 来表示。

（三）设置对照

1、设置对照的主要目的是 。

2、对照实验是指除了 的条件外，其他条件都 的实验。

思考

请设计教材P22页的统计案例的对照实验组。

实验设计

1、实验设计的内容包括 、 、 和 等。

2、根据图示2－7填写以下实验流程：

配制土壤溶液

3、土壤微生物主要分布在距地表 cm的近中性土壤中，约 为细菌。

4、

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是 ，其目的是保证获得 的平板。细菌稀释度为 ，放线菌稀释度为 ，真菌稀释度为 。

5、培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在 ℃培养1～2d，6系列稀释

放线菌一般在 ℃培养5～7d，霉菌一般在 ℃的温度下培养3～4d。

6、在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取 时的记录作为结果，以防止因 而导致遗漏菌落的数目。

注意：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。

7、菌落的特征包括 等方面。

思考 土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？

8、

实验过程应注意的问题

（1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 。

（2）应在 旁称取土壤 10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

(3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

(4）实验时要对培养皿作好 。注明 等。

(5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

思考 在研究未知微生物时务必规范操作，以防被 ，实验后一定要洗手。

3．结果分析与评价

（1）对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助

生物化学

的方法。

（2）在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成了 。氨会使培养基的碱性 ，PH 。因此，我们可以通过检测培养基 变化来判断该化学反应是否发生。

（3）

在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 ，说明该细菌能够 。

补充 鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。

例如测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取 个水样。