课题3　血红蛋白的提取和分离特级教师教学实录｜教案在线预览

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课题3 血红蛋白的提取和分离一、课题的目标：通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，理解色谱法、电泳法二、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法三、课题难点：样品的预处理、色谱柱填料的处理和色谱柱的装填思考：“课题1--DNA的粗提取与鉴定”实验理想的材料是什么？“课题3--血红蛋白的提取和分离”这实验理想

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所属课文：课题3　血红蛋白的提取和分离

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2019-06-24 08:36:00

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课题3　血红蛋白的提取和分离特级教师教学实录

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课题3

血红蛋白的提取和分离

一、课题的目标：通过尝试对血液中血红蛋白的

提取和分离，理解色谱法、电泳法

二、课题重点：凝胶色谱法的原理和方法

三、课题难点：样品的预处理、色谱柱填料的处理

和色谱柱的装填

思考：

“课题1--DNA的粗提取与鉴定”

实验理想的材料是什么？

“课题3--血红蛋白的提取和分离”这实验理想的材料又是什么？原因是？

答：鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取，哺乳类动物成熟的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。

一、基础知识：

（一）蛋白质分离原理

（二）蛋白质分离的方法

1）凝胶色谱法：又称分配色谱法

2）电泳法

（三）缓冲液的作用

蛋白质提取与分离的依据－－

蛋白质的物理化学性质差异：

1.分子的形状、大小

2.电荷性质和多少

3.溶解度

4.吸附性质

5.对其他分子亲和力

2．凝胶电泳法：

电泳：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

1）原理：

不同蛋白质的带电性质（正电荷或负电荷）、电量、分子形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

2）影响蛋白质分子运动速度的因素

3）常用电泳方法

琼脂糖凝胶电泳

聚丙酰胺凝胶电泳

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

在测定蛋白质分子量时通常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，使用时可选用一组已知分子量的标准蛋白同时进行电泳做对照，根据两者的电泳区带位置，利用相关计算公式算出相对分子量

SDS 带负电荷多的

，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷的差别，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

1.洗

涤

红

细

胞

阅读思考：洗涤的目的是什么？

洗涤的方法是什么？

洗涤干净的标志是什么？

2.释放血红蛋白

阅读思考：

释放血红蛋白过程中，在洗涤好的红细胞加入了

哪些物质，有什么用？

目的分析：

蒸馏水的作用是______________________________。

加入甲苯的作用是____________________________。

充分搅拌的目的是____________________________。

注意：

（1）凝胶颗粒＋蒸馏水→充分溶胀；凝胶装填时尽量紧密；装填时不能有气泡存在：因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。

（2）装完后，立即用缓冲液洗涤，使凝胶装填紧密

练习巩固

1、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是

A、

相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对

分子质量较大的蛋白质

B、

相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对

分子质量较大的蛋白质

C、

相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对

分子质量较大的蛋白质

D、

二者根本无法比较

9.样品的加入和洗脱的操作不正确的是

A、加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面

B、加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内

C、等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口

D、用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面

关于本教案的常见问题

Q：课题3　血红蛋白的提取和分离特级教师教学实录是什么类型的资料？

A：这是一份教学教案文档，可用于备课、课堂讲解与课后复习，支持在线预览正文内容。

Q：这份教案对应哪篇课文？

A：对应课文《课题3　血红蛋白的提取和分离》，可从面包屑进入课文目录查看同课其他资料。

Q：如何找到配套课件？

A：页面提供「配套课件/同课文课件」入口；也可进入课文详情页同时查看教案与课件列表。

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