课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优质课教案推荐

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 教学设计

四川省南部中学

马晏平 E-mail:mayp99681397@126.com 邮编：637300 2019-5-21

一．本节课内容的总体目标

课程总体目标：研究培养基对微生物的选择作用，并进行微生物数量的测定

知识目标

情感态度与价值观

能力目标

掌握利用选择培养基分离细菌，运用相关技术进行微生物的计数的方法

能设计可行性的实验方案，能正确使用一般实验工具，进行实验操作

获得生物学基本事

实、概念、原理

、规律、模型等方面的基

础知识

二、教学重点

关注我们身边周围都存在细菌，养成讲究卫生的良好习惯

认识生物科学的价值，养成求实创新勇于实践的科学精神和态度

学会鉴别、选择、运用信息；分析数据，运用证据和逻辑对结果进行评价

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、本课题内容标准

1、研究培养基对微生物的选择作用，“研究”属于知识性领域的目标动词，应用水平

2、进行微生物的分离，“进行”属于技能性领域目标动词，独立操作水平

3、测定某种微生物的数量，“测定”属于技能性领域目标动词，独立操作水平。

五、本课题研究思路

筛选菌株

统计菌落数目

设置对照

六、教学思路：

创设情景提出问题

自主学习分析问题

互动探究解决问题

七、教学流程

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引导学生阅读“课题背

景”知识，引出课题研究的重要意义

对稀释涂布平板法结果

分析，进行微生物的计数的操作

对设计方案进行合理的评

价，进行结果的预测 八、教学过程

教学内容

复习提问

由耐热菌Taq的筛选方法，得出微生物的筛选原理

提供以尿素为唯一氮源的培养基，筛选土壤中分解尿素的细菌

通过阅读材料，搜集所需信息，设计分离微生物的方案

分析实验结果，找出出现的问题及原因，并找到解决问题的对策

课题延伸：大肠杆菌定量测定方法和分解尿素的细菌的初步鉴定方法

教师活动

1.微生物最常用的两种接种方法是什么？

2.什么稀释涂布平板法？其目的是什么？

学生活动

学生回忆

学生自主学习

导入课题

引导学生阅读“课题背景”知识，提出的问题。

回答问题

研究思路

1、教师让学生阅读课本P21，讲解：DNA聚合酶作用，发现过程。引导学生得到启示根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找（即自然界筛选）。

1、DNA聚合酶发现过程，同学们得到什么启示？

2.学生讨论为什么Taq细菌能从热泉中筛选出来吗？

3、学生阅读课本P22侧边栏关于本课题使用的培养基成分相关内容，讨论并回答提供碳源和氮源的分别是什么物质

4.学生分析讨论，以尿素为唯一氮源的培养基能否筛选出分解尿素的细菌

5、学生观看教展示的多媒体图片。

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设计意图

为细菌计数原理、操作做好铺垫

创设情景，引入新课，使学生明确分解尿素的细菌的重要性，突出课题的必要性

引导学生对知识进行迁移学习，培养学生的逻辑迁移思维。

1、筛选

2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为 菌株

提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

黄石公园热泉海底火山

3、教师展示各种筛选菌株方法的多媒体图片：

大肠杆菌显色培养基实验室筛选SARS菌株

4.培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。

缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

5、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数，指出优缺点。

2、间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。

C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

6、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。

通过观看图片，使学生由感性认识过渡到理性认识。培养学生的学科素养。

1、学生讨论能否用来计数土壤中的活菌数。

2、学生讨论并区别：稀释涂布平板法是用来计数的，而平板划线法是用来纯化的。

学生设计实验方案：方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验；方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。

知识的迁移，培养学生的知识整合能力。

2、统计V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml) 菌落数目

M：稀释倍数

每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M 3.教师提出计数过程中应注意那些问题

3、设置对照

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1、实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学筛选出约150个菌落，但其他同学只选择出约50个菌落，分析其原因。教师要求学生设计实验方案。

2、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

培养学生的怀疑精神，并根据自身设计实验方案进行验证。培养学生的实验设计能力。

实验设计

2、土壤取样：

3、制备培养基和样品的稀释：

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学生讨论思考下列问题：

1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。

1、如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均

值，然后按课本旁栏的公式进行计算。

2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

答：因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。

通过实验设计，培养学生设计实验方案能力，培养学生的学科素养。体验无菌操作的实验过程。

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀释。

4、微生物的培养与观察：

每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

1、无菌操作

a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭菌。

b、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

操作提示

学生讨论实验过程的注意事项。

培养学生的创新思维。

c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操作。

2、做好标记

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

3、规划时间

1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选菌落

结果分析与评价

2、样品的稀释操作是否成功

3、重复组的结果是否一致

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素学生交流成果，分析自己的成功之处和需要改进的地方。

培养学生学会对别人评价和自我评价的能力

课题延伸

脲酶的检测

九.板书设计 学生了解酚红指示剂的作用，通过对比

专题二 第二节 土壤中尿素分解菌的分离与计数

一、课题背景

二、研究思路

1、筛选菌株

2、统计菌落数目

3、设置对照

三、实验的具体操作

四、实验分析与评价

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十.课堂总结、点评

土壤中尿素分解菌的分离与分离筛选微生物的原理

微生物计数方法与原理

对照设置与重复设置

实验设计

实验方案

实验操作

结果与分析

人为

有利于目的菌株生长

稀释涂布平板法

十一.反馈提升：

某生物小组以空气中细菌含量为指标，调查校园内不同区域（教室、草场、校长室、卫生间）的空气质量状况。请你写出完整的实验调查方案。

十二、课堂巩固

1.使用选择培养基的目的是（ ）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

2.下列说法不正确的是（ ）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

3.酵母菌能在青霉素的环境中生存而细菌一般不能，为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（

）

A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐

4. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的选择培养基 D．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基

5. 请选出下列正确的取样培养操作步骤

①土壤取样 ②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中

③吸取0.1ml进行平板涂布 ④依次稀释至10、10、10、10、10、10、10稀释度

A．① ② ③ ④ B．① ③ ② ④

C．① ② ④ ③ D．① ④ ② ③ 7.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是(

) A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

1234567十三.教学反思：

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本节课可以从尿素在农业上的重要应用切入，介绍能分解尿素的细菌，进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。在教学过程中，可以联系生产生活实际，使学生对尿素以及分解尿素的细菌形成一定的感性认识。同时通过课题背景的介绍，可以进行STS教育。对于实验中的对照原则，可以指导学生分组讨论，在掌握微生物分离技术的同时巩固实验设计的基本原则。

★资料袋

选择培养基

选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。

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