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土壤中分解尿素的细菌的分离和计数一、研究思路1.筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。2
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt配套的教学设计方案
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关键词:课题2 土壤中分�…ppt配套的教学设计方案
正文
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
一、研究思路
1.筛选菌株
(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
2.统计菌落数目
(1)活菌计数法:常用稀释涂布平板法。
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。
C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M:代表稀释倍数。
③统计方法:为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取其平均值。
(2)显微镜直接计数法:在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3.设置对照
(1)对照实验:指除了被测试的条件外,其他条件都相同的实验。
(2)主要目的:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
二、实验设计
1.土壤取样
从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先铲去表层土,在距地表约3~8 cm的土壤层取样。
2.样品的稀释
(1)稀释原因:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。
(2)稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证获得菌落数在
30~300之间,便于计数。
3.微生物的培养与观察
(1)培养:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。
(2)观察:每隔
24_h统计一次菌落数目,最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
三、操作提示
1.无菌操作
(1)取土样的用具在使用前都需要灭菌。
(2)应在酒精灯火焰旁称取土壤,并在酒精灯火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。
(3)在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在酒精灯火焰旁操作。
2.做好标记:本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆,最好在使用前就做好标记。
3.制定计划:对于耗时较长的生物实验,要事先规划时间,以便提高工作效率。
四、菌种鉴定
1.原理:分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,使培养基的碱性增强。
2.方法:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌,若指示剂变红,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
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