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土壤中分解尿素的细菌的分离和计数一、研究思路1.筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。(2)选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。2

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt配套的教学设计方案

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关键词:课题2 土壤中分�…ppt配套的教学设计方案

正文

土壤中分解尿素的细菌的分离和计数

一、研究思路

1.筛选菌株

(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。

(2)选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。

2.统计菌落数目

(1)活菌计数法:常用稀释涂布平板法。

①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。

C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。

V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。

M:代表稀释倍数。

③统计方法:为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取其平均值。

(2)显微镜直接计数法:在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。

3.设置对照

(1)对照实验:指除了被测试的条件外,其他条件都相同的实验。

(2)主要目的:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。

二、实验设计

1.土壤取样

从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先铲去表层土,在距地表约3~8 cm的土壤层取样。

2.样品的稀释

(1)稀释原因:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。

(2)稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证获得菌落数在

30~300之间,便于计数。

3.微生物的培养与观察

(1)培养:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。

(2)观察:每隔

24_h统计一次菌落数目,最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

三、操作提示

1.无菌操作

(1)取土样的用具在使用前都需要灭菌。

(2)应在酒精灯火焰旁称取土壤,并在酒精灯火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。

(3)在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在酒精灯火焰旁操作。

2.做好标记:本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆,最好在使用前就做好标记。

3.制定计划:对于耗时较长的生物实验,要事先规划时间,以便提高工作效率。

四、菌种鉴定

1.原理:分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,使培养基的碱性增强。

2.方法:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌,若指示剂变红,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

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