课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数名师课堂实录

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

【学习目标】

1 学生预习教材P21 “（一）筛选菌株”，能够整理归纳出实验室筛选微生物的原理，能简单描述如何能得到耐高温的DNA聚合酶，如何分离Taq细菌。

2 学生预习教材P22结合右侧培养基配方基的内容，结合培养基配置及分类能整理归纳选择性培养基的原理及配制要求

3学生预习教材P21“课题背景”内容结合选择性培养基的作用能阐述分离分解尿素的细菌的原理及培养基配置中各物质提供的成分

3学生预习教材P22，整理归纳统计菌落数目的方法

4课堂上通过教师提示，学生合作探究，学生能够对统计菌落数目的方法进行区别,填表整理归纳两种方法的比较

5课堂上通过观看视频，学生能够掌握统计菌落数目的正确操作与计算

6课堂上通过教师提示，学生合作探究，学生能够正确的设置实验对照

重点 选择性培养基的配制，菌落数目的统计

难点 菌落数目的统计

【课前预习】

一

筛选菌株

阅读教材P21 “（一）筛选菌株”，

整理归纳出筛选菌株的基础知识

1筛选菌株

(1) 自然界中目的菌株的筛选

①原理：根据目的菌对 的要求，到相应的环境中去找。

②实例：DNA多聚酶链式反应（PCR）是一项 的技术，

要求使用 。

能产生耐高温的TaqDNA聚合酶的 就是从热泉中筛选出来的

(2)实验室中微生物筛选的原理

人为提供有利于________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。

(2)分解尿素的细菌的分离原理

尿素是一种农业 ，只有被 分解成 之后，才能被植

物吸收利用。

土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是_________________________________________。

2选择培养基

在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或

________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

二

统计菌落数目

阅读教材P22 “（二）统计菌落数目”的内容，整理归纳统计菌落数目的方法

常用来统计样品中活菌数目的方法是 ，也叫 。即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。

测定微生物数量的常用方法还有 直接计数

【预习自测】判断正误

1选择培养基筛选出的微生物只有一种（ ）

2筛选分解尿素的细菌的培养基上不需要添加尿素（ ）

3只要培养基中有尿素就可以筛选出分解尿素的细菌（ ）

4 稀释涂布平板法既可用于统计活菌数也可用于统计样品中死菌数（ ）

5统计菌落数目也可以用平板划线法（ ）

【课堂学习，合作探究】

一

选择培养基

阅读教材P22的第一、二段内容以及小字部分，完成下面内容的归纳总结

1分解尿素的细菌的培养基配方（分析P22左侧培养基配方）

（1）该培养基中含有微生物生长所需的 等营养，

从物理性质划分该培养基属于 ，从功能划分该培养基属于 （2）在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别 和 。

（3）想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有，又是如何进

行选择的? 2选择培养基的制作

（1）在培养基全部成分具备的前提下加入其他物质

在培养基中加入 可筛选金黄色葡萄球菌

在培养基中加入 可筛选出 而抑制细菌放线菌生长

（2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物

培养基中缺乏氮源可分离 培养基中缺乏有机碳源可分离

（3）利用培养基中特定化学成分分离特定微生物

培养基中石油是唯一碳源可分离

培养基中尿素是唯一氮源可分离

（4）通过某些特殊环境分离微生物

在高盐环境中可分离 在高温环境中可分离

二

统计菌落数目

阅读教材P22“统计菌落数目”内容以及小字部分，完成下面内容的归纳总结

1尝试解释为什么统计菌落数目可以用稀释涂布平板法而不能用平板划线法？

2比较显微镜直接计数与稀释涂布平板法计数

项目

显微镜直接计数法

利用特定细菌计数稀释涂布平板法

当样品的 时，培养基表板或血细胞计数板，在面生长的 ，来源于样品稀释液原理

显微镜下计算一定容积中的一个活菌。通过统计平板上的样品中微生物的数量

的 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

主要用具

计数依据

血细胞计数板

固体

培养基

优点

单

缺点

计数方便，操作简计数的是

、活菌都计数在内

操作较复杂，有一定误差

3一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目

。这是因为

。因此，统计结果一般用

而不是活菌数来表示。

4统计菌落数目（如何推测出每克样品中的菌株数）

（1）分析教材中哪位同学的结果更接近真实值，是否改进如果需要如何改进？

（2）推测出每克样品中的菌株数（并分析分别代表的含义）

显微镜直接计数法：每毫升原液含菌数=400x1000x每小格平均菌体数x稀释倍数

稀释涂布平板法：

（3）如何增加实验的说服力？

三

设置对照

1设置对照的主要目的是排除实验组中

对实验结果的影响，提高实验结果的

。

2分析A同学的结果出现的可能原因？如何设置对照排出影响因素？

【巩固练习】练习册P24例1例2例3；

即时巩固1，3，5，能力提升2，5，8,10