课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt配套的板书设计及意图

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

1.

利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

2.分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

3.形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制。

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数。

四、教学过程

教学内容

教师活动

学生活动

设计意图

创设情景，引入新课

导入教师讲解：我们上节学习了培养基的配置以及无菌操学生回忆专题2微课题

作技术，下面来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的生物的实验室培养里面目的微生物。

关于培养基及无菌操作的相关知识。

研究1、教师让学生阅读课本P21，讲解实例：DNA多聚1、学生讨论为什么思路

酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，Taq细菌能从热泉中筛此项技术要求使用耐高温（93℃）的DNA聚合酶，因为选出来吗？

1、筛热泉温度70～80℃，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细 选菌株

菌被筛选出来。引导学生得到启示根据它对生存环境的要 求，到相应的环境中去寻找（即自然界筛选）。 2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为提 供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），2、学生阅读课本 同时抑制或阻止其他微生物生长。 P22侧边栏关于本课题 使用的培养基成分相关 3、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的内容，讨论并回答提供 微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养碳源和氮源的分别是什 基。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

么物质。

2、统计菌落数目

4、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

3、学生讨论培养基如何对微生物进行筛选。 4、学生观看教师展示的多媒体图片。

通过教师讲解知识点，引导学生对知识进行迁移学习，培养学生的逻辑迁移思维。

通过观看图片，使学生由感性认识过渡到理性认识。培养学生的学科素养。

1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数

2、间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。

1、学生举例血球计数板属于直接计数法。

2、学生讨论并区知识的迁移，培养学生

每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml) M：稀释倍数

别：稀释涂布平板法是用来计数的，而平板划线法是用来纯化的。

的知识整合能力。

3、设1、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都置对照

相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的 称为实验组。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

2、实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学筛选出约150个菌落，但其他同学只选择出约50个菌落，分析其原因。教师要求学生设计实验方案。

学生设计实验方案：

方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验；

方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。

学生讨论思考下列问题：

1、如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏

的公式进行计算。

培养学生的怀疑精神。

实验1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示设计

意图。

通过实验设计，培养学生设计实验方案能力，培养学生的学科素养。

2、土壤取样：

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。

3、制备培养基和样品的稀释：

2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

操作提示

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍数稀释。

4、微生物的培养与观察：

每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果。

1、无菌操作

a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭菌。

b、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操作。

2、做好标记

注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。

3、规划时间

答：因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。

学生讨论实验过程的注意事项。

培养学生的创新思维。

结果1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛分析与评选菌落

价

2、样品的稀释操作是否成功

3、重复组的结果是否一致

学生交流成果，分析自己的成功之处和需要改进的地方。

培养学生学会对别人评价和自我评价的能力

知识的延伸与迁移。

课题在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培学生了解酚红指示延伸

养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细剂的作用，通过对比认菌能够分解尿素

清颜色的区别。

脲酶的检测

六、板书设计

七、课后练习

1.使用选择培养基的目的是（ ）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别

2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ) A.CO2和N2 B.葡萄糖和NH3

C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素

3.下列说法不正确的是（ ）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚

合酶。

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、 M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值。

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。

4.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（

）

A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐

答案：CDBC