课题2　月季的花药培养名师课堂实录

菊花的组织培养（接种）教学设计

交大附中生物学科中心 李娟

一、教学目标

1、知识目标：

说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。

2、能力目标：

掌握外植体消毒、接种、培养等基本操作技术。

3、情感目标：

通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。

二、教学重点与难点

重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。

难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。

三、课时安排

1课时

四、教学过程

复习导入：植物体在个体发育过程中将形成不同的细胞和组织，从细胞学的角度来看，这是什么原因呢？（引出细胞分化）

引导学生回顾细胞分化的概念、特点和根本原因。

问题：这些高度分化的植物细胞能不能培养成一个完整的植物体呢？

学生思考回答

高度分化的植物细胞在结构和功能上都比较专一，要培养成完整的植株并不容易，但在离体状态时，给予一定的条件还是可以发育成完整的植株，大家知道原因是什么吗？

学生思考回答：植物细胞具有全能性

讲述：同学们讲得很好，植物细胞虽已高度分化，但细胞内有该物种全套的遗传物质，具有发育成完整个体的潜能。

我们今天要进行菊花花瓣的组织培养，请大家回忆外植体消毒及接种的流程

学生回忆并作答。

一、外植体消毒

外

植

体

洗衣粉水浸泡10min 流水

冲洗

70%乙醇10-30s (于灭菌空瓶中)

接

种

无菌水

冲洗4-5遍

2% NaClO中5min

二、接种（边讲解边进行操作演示）

整个接种过程必须在超净工作台上酒精灯火焰8-10cm范围内进行，外植体消毒也需在超净工作台上进行，用无菌水涮洗好的外植体置于无菌瓶中待用。

1、用枪状镊从无菌瓶中夹取合适的外植体（已消毒），置于无菌平皿的滤纸上，沥去水分。

2、材料吸干后，一手拿镊子，一手拿剪子或解剖刀，对材料进行适当的切割

（叶片、花瓣等切成0.5cm见方的小块）；在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉污染。

3、用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作是：先拧开瓶盖，将组培瓶倾斜30度拿着，瓶口靠近酒精灯火焰，将瓶口在火焰上方转动，让瓶口里外灼烧数秒钟。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入组培瓶内，轻轻插入培养基上。叶片、花瓣直接附在培养基上，以1～3块为宜。

培养材料在培养容器内的分布要均匀，以保证必要的营养面积和光照条件。茎段基部插入固体培养基中，茎尖下端置于培养基表面，叶片通常将叶背接触培养基，这是由于叶背气孔多，利于吸收水分和养分的缘故。

放置材料数量现在倾向少放，通过统计认为：对外植体每次接种以一个组培瓶放2-3组块为宜，这样节约培养基和人力，一旦培养物污染可以丢弃。

接完种后，将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟。瓶盖也要过火，在酒精灯火焰安

全范围内拧紧盖好。所有材料接种完毕，应做好标记，注明材料名称、接种日期等，在合适的条件下进行培养。

请大家分组进行实验，请各组小组长进行指导和协调。（教师巡回观察指导）

三、培养

接种完成后，我们将组培瓶置于无菌光照培养箱中进行初代培养。温度为24℃；光强：3000lux；光照时间为每天12h光照/12h黑暗。

为学生示范光照培养箱培养条件的设置，并引导学生将自己的组培植物有序放入光照培养箱中培养。

我们还需要定期观察记录接种的组织及培养基是否被污染（3-4d）、是否长出愈伤组织及时间、分化根和芽的比例和时间等。请大家三至四天后前来组培室观察自己的作品是否染菌，并在每次课前或课间观察接种组织的生长情况，进行记录。

四、小结

1、植物组织培养的过程

2、实验操作的基本过程

五、板书设计

菊花的组织培养

一、外植体消毒

洗衣粉浸泡10分钟—流水冲洗—70%乙醇消毒—2%次氯酸钠消毒

—无菌水冲洗4至5遍

二、接种

取合适外植体—吸干水分—切割—接种

三、培养

光照培养箱： 24℃、3000lux（12h光照/12h黑暗）