附录4　常用的消毒灭菌操作方法板书设计及意图

《常用的消毒灭菌操作方法》教学设计

学校：湖南省衡阳市祁东县第二中学 指导老师：李端扬

授课老师：周彬 【课题】

选修1附录4 ------ 常用的消毒灭菌操作方法 【教材分析】

在传统的发酵生产中和工业生产中，都需要运用到我们的无菌操作技术。教材中的《专题2的课题1》部分对无菌操作技术进行了简单的介绍，而无菌操作技术中往往是微生物实验成败的关键所在，所以今天我们针对选修1教材的附录4所提到的三种常用的消毒灭菌方法进行一个较详细的学习。

【教学目标】

一、知识与技能

①

了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用,掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。

②

了解干热灭菌的原理和应用，掌握干热灭菌的操作技术。

③

了解紫外线灭菌的原理和方法

二、过程与方法

通过实验操作掌握高压蒸汽灭菌法。

三、情感、态度与价值观

①

通过团队合作完成实验，培养勇于探究与合作的科学精神以及实验分析能力。

②

增强保护环境和保护自我的意识，增强社会责任感。

【教学重难点】

1、

重点

高压蒸汽灭菌法的原理以及操作方法

2、难点

高压蒸汽灭菌法的原理以及操作方法

【教学设计】

一、课程导入

在上节课中我们已经学习了微生物实验室培养的一些内容，其中包括：培养基以及培养基的配置、无菌操作技术以及大肠杆菌纯化的实验操作。我们知道获得纯净培养物的关键是要掌握无菌技术。对无菌技术进行简单的复习，然后过渡到选修1教材的附录4提到的三种常用的消毒灭菌操作进行一个系统的学习。

二、教学目标展示

三、阅读教材

让学生带着问题阅读教材相关内容并完成学案。引导学生自己总结该方法的原理、操作步骤以及注意事项。

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高压蒸汽灭菌 1、原理：它是利用在密闭条件下产生高压蒸汽来达到灭菌的效果。（121℃、100kPa、 维持15－30min) (其温度在100oC以上，有强大的杀菌能力。

因此它是一种用途广泛，效率高的灭菌方法。) 2、操作步骤：

（1）加入适量自来水于灭菌锅中（至水位线）

（2）摆入待灭菌的物品

（3）加盖旋紧螺旋，使蒸汽锅密闭不漏气. （4）打开放气阀，打开电源，自开始产生蒸汽后10分钟关紧放气阀， 让温度随蒸汽压力上升而上升，当达到所需压力时，控制热源维持所需时间（20分钟）然后停止加热，让其自然冷却。

（5）待压力降至0磅时，打开排气阀，再打开锅盖，取出灭菌物。

3、注意事项：

（1）装物品不要装的太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果，锥形瓶和试管口不与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。

（2）要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。

（3）灭菌结束后，让锅内压力自然下降，以免灭菌容器内液体冲出，造成污染。

四、实际操作

拿出实验仪器——高压蒸汽灭菌锅,图片和实物相结合认识下高压蒸汽灭菌锅的结构。然后请一个同学上来向大家展示一下怎么使用高压蒸汽灭菌锅来进行灭菌。下面的同学可以观察看看有没有和你总结的实验步骤不一样的地方。操作完成后先让同学们自己总结归纳，然后教师作最后的小结。

五、播放视频

让同学们把自己的操作过程与视频中实验操作进行对比。

六、提问学习

教师以提问的形式检测同学们对另外两种方法的学习情况。

干热灭菌：

1.大致操作步骤:装入待灭菌物品→灭菌→降温→开箱取物

2.控制条件：温度160~170℃，时间3~4小时

3.开箱取物时要等温度降到 70℃

紫外线灭菌：

原理：破坏微生物的DNA结构，使细菌当场死亡或不能繁殖后代，达到杀菌的目的。

(波长为200-300nm的紫外线都有杀菌能力，其中以260nm的杀菌力最强) 七、提出问题，分组讨论

讨论1：微生物实验中常用的器皿、接种工具有哪些？这些容器和培养基可以选择什么方法来灭菌？

试管、锥形瓶、平板、烧杯、玻璃棒、接种环、涂布器等

讨论2：附录四提到的这三种灭菌方法中干热灭菌的需要时间较长，根据资料，分析原因是？

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答案：细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。

八、课堂小练

1、

在微生物的培养

操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行______，

操作者的双手要清洗和______，空气中的细菌可以用紫外灯来杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_______________。 答案： 灭菌 消毒 损伤DNA

2、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用到消毒灭菌方法依次是( ) A 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 灼烧灭菌

化学消毒 紫外线消毒 巴氏消毒

B 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒

C 巴氏消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 化学消毒 高压蒸汽灭菌

D 干热灭菌 紫外线消毒 灼烧灭菌 化学消毒 巴氏消毒 高压蒸汽灭菌 答案：A

3、外科手术器械和罐头食品的处理，要以能够杀死（ ）为标准。

A 球菌 B 杆菌 C 弧菌 D 芽孢

答案：D 九、课堂小结

最后我们大家一起来对本节课的学习进行一个小总结：

1、高压蒸汽灭菌-----温度121℃，压强100KPa,维持15-30min。

2、干热灭菌----温度160-170℃，时间3-4小时。

3、紫外线灭菌----接种室在使用前用紫外灯照射30min。

注意：做完微生物培养实验后的平板和培养基不能直接丢弃，必须要将其灭菌之后才能丢弃，以防污染环境和造成感染。

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【教学反思】

这节课思路清晰明朗，学生自学教材总结，之后合作完成具体的实验操作。播放视频让学生对比总结自己操作的不足，分组讨论学以致用，练习题加以辅助。掌握速度较快，难度不大，但学生的动手操作能力有待进一步的熟练和提升，全面分析实验能力有待加强。

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