课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优质教案设计

2.1微生物的实验室培养

课前自主学习部分：

一、培养基

1.培养基

（1）培养基的种类按物理状态分，包括 培养基和 培养基等。

（2）培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四类营养成分。

（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、 以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ；培养霉菌时需要将培养基的PH调至 ；培养细菌时需要将培养基的PH调至 ；培养厌氧微生物时需要提供 的条件。

【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？

2.无菌技术

（1）获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：

① ② ③ ④ （2）消毒是指 灭菌是指 【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？

（3）实验室常用的消毒方法是 ，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用 、 等。常用的灭菌方法有

、 、 ，此外，实验室里还用 或 进行消毒。

二、实验操作

1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：

→ → → →倒平板

（2）倒平板的过程

① ② ③ ④

2.纯化大肠杆菌

（1）微生物接种的方法中最常用的是 和 。

平板划线法是指 。

稀释涂布平板法是指 。

（2）平板划线的操作步骤如下：

① ② ③ ④ ⑤

⑥ ⑦ （3）系列稀释操作步骤：

① ② ③ （4）涂布平板操作步骤：

① ② ③ ④ 3、菌种的保存

为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种，我们可以采用 法；对于需要长期保存的菌种，可以采用 法。将菌种放在低温环境中保藏的目的是 ，但时间长了菌种还是要老化的，因此对临时保存的菌种 个月后需重新接种。

[来源:学科网]【基础训练】

1．下列有关培养基的叙述正确的是 ( ) A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基

C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基

D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落

2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )

A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素

C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素

3．获得纯净培养物的关键是 ( ) A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌

B．接种纯种细菌

C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵

4．下列常用的无菌操作中错误的是 ( ) A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源

C．验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭

5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

[来源:Z,xx,k.Com][来源:学+科+网]

6．有关倒平板的操作错误的是 ( ) A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置

7．有关平板划线操作正确的是 ( ) A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌

B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞

C．沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可

D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养

8．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 ( ) A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释

B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面

C．再放在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落

9．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是 ( ) A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染

C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用

10．自养生物唯一碳源的是（ ）

A．糖类 B．

石油 C．

二氧化碳 D．

花生粉饼

【课后巩固】

11．菌种保存控制的条件是（

）

（1）湿度 （2）

低温 （3）

干燥 （4）

有光 （5）隔绝空气 （6）适当有氧

A．（1）（4）（6） B．（2）（3）（6） C．（1）（5）（6） D．（2）（3）（5）

12．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（ ）

A．含碳有机物 B．蛋白胨 C．含碳无机物 D．花生粉饼等天然物质

13．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（

）

A．利于大肠杆菌的接种

B．防止杂菌污染

C．利于培养的冷却

D ．防止皿盖冷却水倒流入培养基

14．含C、H、O、N的大分子化合物可以作为（

）

A．异养微生物的氮源、能源

B．异养微生物的碳源、氮源

C．自养微生物的氮源、能源、碳源

D．自养微生物的氮源、能源、碳源

15. 关微生物营养物质的叙述中，正确的是

A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量

C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量

16. 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是

A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌

C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前

17．鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在 中保温1-2天看有无 ，如果没有 说明制作合格，反之则不合格。

[来源:学.科.网]

18．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。

(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是______________。

(3)为了使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。

(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越________。

(5)如果要检测水中是否含有大肠杆菌，培养基中还应加入________。

19.右表是某微生物培养基成分，请据此回答：

（1）右表培养基可培养的微生物类型

编号

成分

含量

是 。

①

粉状硫

10g （2）若除去成分②，加入（CH2O），该培

②

（NH4）2SO4 0.4g 养基可用于培养 。

③

K2HPO4 4.0g （3）表中营养成分共有 类。

④

MgSO4 9.25g （4）不论何种培养基，在各种成分都溶化

⑤

FeSO4 0.5g 后分装前，要进行的是 。

⑥

CaCl2 0.5g （5）右表中各成分重量确定的原则⑦H2O 100ml 是 。

（6）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是 。

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