资料摘要

课题:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、教学目标1.利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数2.分析研究思路的形成过程,找出共性和差异性3.形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯二、教学重点对土样的选取和选择培养基的配制三、教学难点对分解尿素的细菌的计数四、教学过程(一)

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学实录及点评

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学实录及点评

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课题:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、教学目标

1.利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

2.分析研究思路的形成过程,找出共性和差异性

3.形成无菌不在的概念,养成讲究卫生的习惯

二、教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学过程

(一)展示学习目标

(二)展示学习问题

1.选择培养基的概念?分离土壤中分解尿素的细菌,如何设计培养基?

2.如何判断培养基起到选择作用?

3.统计菌落数目的方法有哪些?分别有什么不足之处?(二)导引探究:

4.两位同学统计的菌落数目更接近真实值?这两位同学的实验需要改进吗?如需改进如何操作?

5.土壤中细菌数量的测定一般选择多少倍稀释液进行培养?分离不同微生物采用的稀释度相同吗?

6.土壤中分解尿素的细菌的鉴定方法与原理是什么?

(三)师生点评

1、筛选菌种

实例:寻找耐高温的DNA聚合酶

PCR技术:要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。

筛选原因:因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物,使耐热的Taq细菌保留下来。

2、实验室中微生物的筛选原理:

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。

3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基:

①从物理性质看此培养基属于哪类?从功能上属于哪类培养基?

②在此培养基碳源、唯一的氮源的作用?

培养基选择出的是什么微生物?为什么?

4、统计菌落数目:

利用血球计数板(血细胞计数板),在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

稀释涂布平板法:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

5、实验的具体操作

1

㈠.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。

◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

㈡.制备培养基:

制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。

样品的稀释

◆应在火焰旁称取土壤10g。

◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行

◆分离不同的微生物采用不同的稀释度

原因:不同微生物在土壤中含量不同

目的:保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板

结果分析与评价

1.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。

2.提示:选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确。

(四)课堂总结、点评

土壤人为

分离筛选微生物的原理

中尿条件

素分

解菌微生物计数方法与原理

的分

对照设置与重复设置

离与

计数

实验方案

实验设计

(五)教学反思:

有利于目的菌株生长

抑制或阻止其他微生物生长

稀释涂布平板法

显微镜直接计数

实验操作

结果与分析

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