课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学评价实录

课题2：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

【课程标准】

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定

【学习重点】

对土样的选取和选择培养基的配制。

【学习难点】

对分解尿素的细菌的计数。

【自主阅读】

一、研究思路

（一）筛选菌株

1．实验室中微生物的筛选主要是指人为提供有利于目的菌株生长的 ，同时抑制或阻止其他微生物的生长。

2．分解尿素的细菌主要有 ， ， 。

3．选择培养基是指 。

加入 可以分离出 ， 。加入 可以分离出 。

（二）统计菌落数目

4．统计菌落数目的方法主要有 ， ， 。

5．统计菌落数目的理论依据是当样品度足够高时， 。

6．为保证统计结果准确，通常将 涂布在平板上，培养后再选择 的平板进行计数。

7．在设计实验时，一定要涂布至少 个平板作为重复组，才能增强实验的说服力和准确性。

（三）设置对照

8．设置对照的主要目的是 ， 。

9．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的研究思路是 ， 。

二、实验设计

10．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验流程是

，

，

， ， ， 。

11．土壤中的微生物大约有 的细菌，绝大多数分布在 。

12．测定土壤中细菌的数量一般选用 倍的稀释液进行平板培养，一般在 温度下培养 天，每隔 ，小时统计一次菌落数目，选取 时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目。

13．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需要注意的问题是 ， ， 。

14．准确鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 ，出现的现象是 。

【典例分析】

下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果：

组分

含量

NaNO3 KH2PO4 KCl 2g 1g 0.5g MgSO4 FeSO4 蔗糖

0.5g 0.01g 30g 琼脂

15g 蒸馏水

1000ml 试验目的：略

实验材料和用具：略

实验方法和步骤：

（1）

接种

①

接种前，准备好盛有上述配方的培养基，放入培养皿中并灭菌，供试验用

②

取10g土壤，放在无菌研钵中，注入5ml水，并用无菌玻璃棒搅拌均匀，备用

③

将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。将培养皿盖轻轻放在桌面上，手拿培养皿，将接种环放在培养基边缘处冷却。然后，用接种环沾取少许泥浆，轻轻的点接在培养基表面上，共点接15－20处

④

接种后，轻轻地盖上培养皿盖，将培养皿放在试验桌上。

（2）

培养

将接种的培养皿放入恒温箱内，在28－30℃的温度下培养3－4d （3）

观察 3－4d后，取出培养皿，仔细观察培养基上稀泥浆周围出现的黏液。黏液初未无色透明，以后乳白色，最后变为褐色。表明含有自生固氮菌。

（4）

镜检：略

该实验方案中有几处明显错误，请指出错误并改正（至少三处）

1.错误 应改为 应改为 3．错误 应改为 2.错误 【跟踪练习】

1．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有

（1）尿素 （2）

有机氮化合物 （3）无机盐 （4）

有机碳化合物 （5） 水 （6）无机碳化合物

A （1）（3）（4）（5） B （2）（3）（4）（5）

C （1）（3）（5）（6） D（2）（3）（5）（6） 2．可用于菌落数目统计的培养基是（ ）

A 固体培养基 B液体培养基 C半固体培养基 D天然培养基

3．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）

A一个细菌 液体培养基 B许多细菌 液体培养基 C一个细菌 固体培养基 D许多细菌 固体培养基

4．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（

）

A加入青霉素的培养基 B 固体培养基 C液体培养基 D加入高浓度食盐的培养基

5，下表资料表明在各种培养基中细菌的生长（S C M ）为简单培养，UVXYZ代表加入培养基的不同物质，问哪一种物质细菌不能合成（ ）

培养基

SCM SCM + V +Z SCM+U+Y SCM+Z+X SCM+v+Y SCM+U+X SCM+Y+Z __ __ + __ + __ + 生长状态

A. U B. V C. Y D. Z 6. 培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是（ ）

A含热量太多 B 会使微生物失水 C 导致微生物休眠 D培养基中的碳源和氮源比例失衡

7．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是（

）

（1）菌落大小 （2）

菌落形状 （3）

菌落的隆起程度 （4）菌落的颜色 （5）

菌落的透明度

A（1）（2）（3） B（2）（3）（4）

C（1）（3）（4） D（1）（2）（3）（4）（5）

8．某同学在１０、100、1000倍稀释液的平均菌落数为2760、295、46,则菌落总数为( ) A 27600 B 29500 C 46000 D 37750

9.下列氮肥能被植物直接吸收的是( ) (1)硝酸盐 (2) 尿素 (3)磷酸二氢氨 (4) 氨

A(1) (2) (3) (4) B(1) (3) (4) C (2) (3) (4) D (1) (3) 10．将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间后能得到（ ）

A无一定形态的群体 B 菌丝 C单个细菌 D菌落

答案提示：

【典例分析】

1.

培养基中含有NaNO3， 不含N的纳盐

2.

②中使用蒸馏水 无菌水

3.

③中将培养皿盖放在桌面上 略微打开培养皿盖

4.

④中未填写实验内容、接种人姓名和接种日期

在顶盖上写明实验内容、接种人姓名和接种日期

【跟踪练习】

1.A 2.A 3.C 4.B 5.C 6.B 7.D 8.C 9.B 10.D