课题3　分解纤维素的微生物的分离优质课教案

专题2

课题3

分解纤维素的微生物的分离导学案

一、教学目标

1、掌握纤维素酶的种类及作用

2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法

二、教学内容

（一）纤维素和纤维素酶

阅读课本27页基础知识，完成下列内容：

1、纤维素在生物圈的分布状况？

纤维素是地球上含量最丰富的

类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中

是自然界中纤维素含量最高的天然产物。

2、纤维素酶的组成及作用？

纤维素酶是一种

酶，一般认为它至少包括三种组分，即

、

和

，前两种酶使纤维素分解成

，第三种酶将纤维二糖分解成

。

（二）纤维素分解菌的筛选

1、纤维素分解菌的筛选方法

染色法：这种方法能够通过颜色反应直接

对微生物进行

. 2、纤维素分解菌的筛选方法的原理

刚果红是一种染料，它可以与

形成红色复合物，但并不和

、

发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的

。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选

. （三）实验操作（完成下列问题）

1、土壤取样：取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？

2、选择培养的目的：

3、制备选择培养基（课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题）

a、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？

b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具

有，是如何进行选择的？

c、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用

（四）结果与分析与评价

1、刚果红染色法中两种方法各有哪些优点与不足

2、培养基的制作是否合格？以及选择培养基是否筛选出菌落

三、提高练习

1．下列生物能分解纤维素的是(

)

①人

②兔

③牛

④蘑菇

⑤纤维杆菌

A．①②③④⑤

B．②③⑤

C．②③④⑤

D．③⑤

2．纤维素酶可以将下列哪种物质分解(

)

A．牛肉片

B．鱼片

C．滤纸条

D．塑料条

3．下列不属于纤维素酶组分的是(

)

A．C1酶

B．Cx酶

C．葡萄糖苷酶

D．半乳糖苷酶

4．纤维素酶发挥作用的最适pH是(

)

A．2.0

B．4.8

C．6.8

D．7.8 5．刚果红能与下列哪种物质形成红色复合物(

)

A．葡萄糖

B．纤维二糖

C．麦芽糖

D．纤维素

6．从土壤中分离获得某种微生物的步骤是(

)

①土壤取样

②梯度稀释

③选择培养

④涂布培养

⑤筛选菌株

A．①②③④⑤

B．①③②④⑤

C．①②④③⑤

D．①④②③⑤

7．纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于有(

)

A．NaNO3

B．KCl

C．酵母膏

D．纤维素粉

8．分离土壤中纤维素分解菌所用到的方法是(

)

①稀释倒平板法

②涂布平板法

③单细胞挑取法

④选择培养基分离

A．①②

B．②③④

C．②③

D．①③④

9．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(

)

A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B．富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少

C．经稀释培养后，用刚果红染色

D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

10．纤维素、纤维素酶和控制纤维素酶合成的物质，它们的基本组成单位依次是(

)

A．葡萄糖、葡萄糖和氨基酸

B．葡萄糖、氨基酸和核苷酸

C．氨基酸、氨基酸和核苷酸

D．淀粉、蛋白质和核酸

11．下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是(

)

A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵

B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验

C．纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定

D．纤维素酶是一种复合酶

12．在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（

）

A．用液体培养基可获得大量菌体

B．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长

C．用液体培养基可以充分利用培养基中营养物质

D．用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌

13．在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是(

)

A．完全除去其他微生物

B．没有意义，去掉这一步更好

C．增加纤维素分解菌的浓度

D．使纤维素分解菌充分长大

14．两种刚果红染色法的结果是(

)

A．均会出现透明圈

B．均不会出现透明圈

C．方法一出现,方法二不出现

D．方法一不出现，方法二出现

15．纤维素酶在植物细胞工程方面有着广泛的应用，你认为在下列哪种生物体中提取纤维素酶比较合理(

)

A．发酵酵母

B．在腐木上生长的霉菌

C．高等植物细胞

D．白蚁体内的鞭毛虫

16．为了测定某种分解纤维素的微生物生长所需要的最适宜pH，某同学设计了下列实验步骤：

(2)若按改正后的实验步骤，请将预测的结果用曲线图表示走势。

17．富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物的生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

①配制适宜的培养基，分别装到锥形瓶中，用缓冲液分别调pH为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，并分别标号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。

②将每瓶培养基等量分别装到5支试管中，加棉塞并包扎成5捆。

③将试管放到1个大烧杯中，在酒精灯上加热煮沸10min灭菌，待温度冷却到50℃，将试管搁置斜面。

④在无菌条件下，往5组试管中接种等量的菌种。

⑤25℃～28℃恒温箱中培养24h。

⑥测定每支试管中培养基的重量，记录并统计分析结果。

(1)上述步骤中有5处明显错误，请找出并加以改正。

(1)本实验所需培养基为_________，碳源为_________。

(2)实验原理是____________________________________________________。

(3)①→③重复培养的目的是_____________________________________。

(4)⑤的菌落中大部分是降解_________的微生物。

(5)⑥为_________组，⑦为_________组，设置⑥的目的是_________。

(6)⑤→⑥采用_________法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是__________________。