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课题3:血红蛋白的提取和分离一.教学目标知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神二.教学重点:凝胶色谱法的

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课题3 血红蛋白的提取和分离教学设计(教案)

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关键词:课题3 血红蛋白�…教学设计(教案)

正文

课题3:血红蛋白的提取和分离

一.教学目标

知识与技能

1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白

2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理

过程与方法

体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求,注意按照操作提示进行相关步骤

情感、态度与价值观

初步形成科学的思维方式,发展科学素养和人文精神

二.教学重点:凝胶色谱法的原理和方法

教学难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

三.教学工具:多媒体

四.教学过程

(一)引入

蛋白质是生命活动的主要承担者,是细胞内含量最高的有机化和物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。怎样提取蛋白质呢?

(二)进行新课

1.基础知识

蛋白质的物化理性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离各种蛋白质。

1.1凝胶色谱法(分配色谱法):

(1)原理:(图5-13a)分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。

(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。

(3)分离过程:(图5-13b)

混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子

*洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。

1.2缓冲溶液

(1)原理:由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成(如H2CO3-NaHCO3,HC-NaC,NaH2PO4/Na2HPO4等),调节酸和盐的用量,可配制不同pH的缓冲液。

(2)缓冲液作用:抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1.3凝胶电泳法:

(1)原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方

向、阻力不同,导致不同

蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

[思考]阅读教材

后,填写下表:

(2)分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。

(3)分离过程:在一定pH下,使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

2.合作探究:

要点一:蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析

(1)

凝胶色谱法有哪些用途?

(2)

相对分子质量不同的蛋白质的凝胶中的运动情况如何?

典例分析:见课件

即使练习:见课件

要点二:血红蛋白的提取和分离实验操作分析

(1)

样品处理、分离与纯化的目的有什么不同?

(2)

离心后的血红蛋白溶液包括哪几层?

(3)

你知道血红蛋白是如何提取和分离的吗?

典例分析:见课件

即使练习:见课件

(三)课堂小结:

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关于本教案的常见问题

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