课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计思路

土壤中分解尿素的细菌的分离和计数训练题

一、单选题

A. 试管1、2、3 B. 试管2、3、4 C. 试管3、4、5 D. 试管4、5、6 2.下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述中，正确的是（

）

A. 利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数

B. 对培养皿进行编号或对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿底标记

C. 倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

D. 将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养，防止培养液沾染试管壁引发污染

3日前微博传言手机屏幕比马桶按钮单位面积上的细菌多，为辨别真伪，两电视台利用微生物培养技术进行实验，过程及结果如下。下列叙述错误的是

．．

1.用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时，一般选择如图中哪几支试管中的稀释液来涂布平板

A. 本实验采用稀释涂布平板法接种

B. 本实验不需要设置对照组实验

C. 本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐

D. 两个报道结果不同，可能是因为取样环境不同

4.有些细菌可以分解原油，从而消除由于原油泄漏造成的土壤污染。某同学从受原油污染的土壤中，筛选出能高效降解原油的菌株。下列相关操作不正确的是

（

）

．．．A. 将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基初筛菌种

B. 纯化菌种时，可用平板划线法或稀释涂布平板法分离得到单菌落

C. 通过比较纯化得到的菌种的降解效率以获得降解能力强的菌株

D. 可通过基因组测序方法对筛选得到的菌株进行分子鉴定

5.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．下列说法错误的是（

）

A. ①过程称为稀释，②过程是为了单个菌落的筛选

B. Ⅰ号培养基称为选择培养基，该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分--硝酸铵为其提供氮源

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C. 该嗜热菌细胞壁的合成易受到青霉素的抑制

D. 在酶的分离提纯过程中，保持酶的活力是非常重要的

6.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是（

）

A. 都只能用于固体培养基接种

C. 接种培养后均可获得单菌落

二、填空题（本大题共4小题，共4.0分）

7.不同品牌的酸奶具有不同的口味。某研究小组利用含碳酸钙的固体培养基探究甲，乙两品牌酸奶中乳酸菌的类型是否相同(乳酸能够溶解碳酸钙，使培养基变得透明)。请回答下列问题: ⑴将甲、乙两品牌酸奶中的乳酸菌纯化，分别接种在含碳酸钙的固体培养基中培养，根据菌落周围透明圈的大小，可确定酸奶中乳酸菌的类型。不同乳酸菌菌落透明圈大小不同的原因是___________________________________________________________________。

⑵家庭制作酸奶时，在纯牛奶中加入少量酸奶相当于微生物培养技术中的 操作。纯牛奶变成酸奶，改变了口味但含有的能量减少，原因是 ___________________________________。

⑶为长期保存纯化的优质乳酸菌，可将菌液与_______充分混匀，置于-20C的冷冻箱中保存。

⑷该研究小组进一步探究甲品牌酸奶中乳酸菌数量，实验操作如下图。接种微生物的方法有很多，图中过程③所示的方法为 ____________,用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10后，才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml), 这里的n=______用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个平板，目的是_______________________,如果平板菌落数超过300，一般还需进一步________________。

n0B. 都能用于微生物的计数

D. 接种工具使用后需要灭菌

8.牛奶是日常生活中经常食用的乳制品，对人体健康有很大好处。环保科技兴趣小组从某牛奶厂排污口获取水样，希望从中筛选出能高效降解蛋白质的细菌。据有关知识回答下列问题。

(1)对牛奶进行消毒常用的方法是_________，其优点是______________________。

(2)为实现筛选目的，该兴趣小组使用了如下配方的培养液。

在配制培养液时________(填“能”或“不能”)将该配方中的蛋白质换成葡萄糖，原因是_____________________________________________________________________。

(3)为实现目的菌株的分离和计数，应在该配方中加入______________，制成平板，常用的接种方法是_________________。为检测所使用的平板灭菌是否彻底或是否被污染，操作方法是___________________________________________。

9.牛等牲畜的瘤胃中生活着许多以尿素作唯一氮源的微生物。某同学从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，获得菌液，并对能分解尿素的细菌进行分离、计数和鉴定。回答下列问题：

（1）为从混杂的菌液中分离菌种，常用________________和________________法在固体培养基上接种，使细菌在固体培养基上形成单个________________，从而获得纯菌株。

（2）为了测定细菌含量，将稀释度为10的菌液均按0.1 mL的用量，各接种3个平板，在无氧条件培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为45、56、37，则每升菌液的活菌数约为__________个。3第2页，共3页

与活菌的实际数目相比，该方法测得的结果往往偏低，主要原因是______________________________________________________________________。

（3）为了鉴定该菌种，在以尿素为唯一氮源的培养基上需添加________________作指示剂，目的菌在生长过程中会产生________________酶，催化尿素分解并产生NH3，使pH升高，指示剂变红。

10.幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的螺旋状短杆菌，具有很强的脲酶活性。如表是某实验小组培养幽门螺杆菌所用培养基的配方（培养细菌一般用牛肉膏蛋白胨培养基）．请回答下列问题：

成分

含量

葡萄糖

10g KH2PO4

0.2g MgCl 0.2g NaCl 0.2g CaSO4

0.2g CaCO3

5g 琼脂

3.5g 蒸馏水

1L （1）实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的______、______、pH等条件，抑制或阻断其他微生物的生长，能达到此目的培养基称为______。

（2）在选择培养幽门螺杆菌时，培养基中要加入尿素和酚红指示剂，这是因为幽门螺杆菌可以合成______，能分解尿素。若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现______ 色环带。

（3）将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时少，主要原因是______。

（4）某小组采用平板划线法分离该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_ _____。

（5）若要对活菌进行计数应采用______方法，计数结果______，原因是___ ___。

CBBACB 7.

【答案】（1）(在相同时间内)不同类型的乳酸菌产生乳酸的量不同，不同量的乳酸能够溶解碳酸钙量不同，形成的透明圈大小不同

（2）接种；乳酸菌在发酵时使牛奶中的营养成分发生改变，乳酸菌细胞呼吸消耗部分有机物，从而使能量减少

（3）灭菌的甘油

（4）稀释涂布平板法； 6；设置重复组，取平均值，使实验结果更加准确可靠；稀释

8.

【答案】（1）巴氏消毒法；既能杀死牛奶中的微生物，又不会破坏牛奶的营养成分

（2）不能；要筛选出能高效降解蛋白质的细菌，配制培养液时必须以蛋白质作为唯一碳源和氮源，所以不能把蛋白质换成葡萄糖

（3）琼脂；稀释涂布平板法；选择未接种的平板在适宜条件下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生

9.

【答案】I.（1）平板划线法；稀释涂布平板法；菌落

（2）4.6×10个；两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

（3）酚红；脲

10.【答案】（1）温度；营养；选择培养基

（2）脲酶；红

（3）该培养基中缺少氮源

（4）将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落

（5）稀释涂布平板法；偏低；当两个或以上菌体连在一起时只形成一个菌落

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