课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第一课时评课稿

第

单元 课

题

名

称

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

第（ ）课

时

总课时数

教材及学内容，上节课学生已经学了微生物的实验室培养的基本操作方法和注意事项，而情分析

本节内容是在此基础上对微生物培养应用学习，起承上启下的作用。

<土壤中分解尿素的细菌的分离与计数>是人教版高中生物选修一专题二课题2的1、利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

教学目标

2、

分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

3、形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯

教学重点

对土样的选取和选择培养基的配制

教学难点

对分解尿素的细菌的计数

教法学法

启发式教学

教学资源及课前准多媒体课件

备

教学环节

教学过程设计

二次备课

一、引入新课

二、新课

1．基础知识

上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的目的微生物。

（1）

尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为

氨和CO2

，这是因为细菌能合成

脲酶

。

（2）

科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为

热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物

，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是

人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长

。

〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是

葡萄糖

，提供氮源的的是

尿素

，琼脂的作用是

凝固剂

。

〖思考2〗该培养基对微生物

具有

（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是

只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长

。

（3）在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是

稀释涂布平板法

。除此之外，

显微镜直接计数

也是测定微生物数量的常用方法。

【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。

公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量

（4）

采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于

样品稀释液中一个活菌

。通过统计

平板上的菌落数

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在

30～300 的平板进行计数。

〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是

（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数

。

〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是

恰当的稀释度

。

（5）统计的菌落数比活菌的实际数目

低

。这是因为当

2．实验设计

两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是

一个

菌落。因此，统计结果一般用

菌落数

来表示。

（6）设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

（1）

实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。

（2）根据图示2－7填写以下实验流程：

（3）土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。

（4）

分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。

（5）

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。

（6）在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

（7）菌落的特征包括

形状、大小、隆起程度、颜色

等方面。

（8）实验过程

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。

2）应在火焰旁称取土壤

10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。

4）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。

5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。

3．结果分析与评价

（1）

对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助

生物化学

的方法。

（2）

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的

脲酶

将尿素分解成了

氨

。氨会使培养基的碱性

增强

，PH 升高

。因此，我们可以通过检测培养基

pH 变化来判断该化学反应是否发生。

（3）

在以

尿素

为唯一氮源的培养基中加入

酚红

指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变

红

，说明该细菌能够

分解尿素

。

〖思考〗测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到

伊红美蓝

培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现

黑

色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。你认为在该实验中至少应取

三

个水样。

1、对细菌群体生长规律测定的正确的表述是

A．在液体培养基上进行

B．至少接种一种细菌

C．接种一个细菌

D．及时补充消耗的营养物质

答案：A 2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是

A．调整期

B．对数期

C．稳定期

D．衰亡期

答案：C

三、课堂总结

四、练习

板书设计

作业设计

（一课时一反思，

思考教学得失、教学效果、课堂生成、改进措施）

教学反思

1

（一课时一反思，

思考教学得失、教学效果、课堂生成、改进措施）

教学反思

2

（一课时一反思，

思考教学得失、教学效果、课堂生成、改进措施）

教学反思

3