课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第一课时教学实录

伦教中学高二生物 编号:006 主备人:朱成元 审核人：高二备课组 时间:2018年3月2日

选修一 1-2传统发酵技术的应用

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 班别： 姓名： 学号：

一、教学目标：

1.掌握利用选择培养基分离细菌的原理和方法。

2.学会运用活菌计数法测定土壤中分解尿素的细菌的数量。

二、预习自测（独学、群学）

一、筛选菌株

1．原理：人为提供有利于

生长的条件(包括营养、

、pH等)，同时抑制或阻止其他 生长。

2．途径：用 培养基筛选。

二、统计菌落数目的方法和注意事项

1．常用方法：稀释涂布平板法。

(1)统计依据。①当样品的

足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。

②通过统计平板上的 来推测样品中大约含有的活菌数。

(3)注意事项。

①一般选择菌落数在 的平板进行计数。

②统计菌落数往往比活菌的实际数目 。

③统计结果一般用 而不是用 来表示。

④设置对照：目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

2．计数方法。

利用 直接计数。

三、实验设计

1．土壤取样。2．样品的稀释。3．细菌的培养与观察。4．细菌的计数。

在同一稀释度下至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度计算出样品

三、问题探究：

1．分离土壤中分解尿素细菌的培养基为何能起到选择作用？

2．如果让你去分离某种微生物，你会怎么做？

3．微生物的计数方法有哪些？

4．如何分析实验结果？

四、课堂检测（独学及群学）

1、下面是本课题将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题：

(1)在

编号 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是________，提供氮源的是________。

(2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。

(3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？________ 2、自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。

步骤：①制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。②用稀释涂布平板法接种样品。③适宜温度下培养。

结果分析：

(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______。

A．一个平板，统计的菌落数是23 B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24 C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26 D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25 (2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌株数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)___________。

(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为_____________________________。

(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？_______________________________。

五、课堂小结

六、课余作业

某生物小组以空气中细菌含量为指标，调査校园内不同区域(教室、草场、校长室、卫生间)的空气质量状

况。请你写出完整的实验调查方案

七、教学体会

本节课可以从尿素在农业上的重要应用切入，介绍能分解尿素的细菌，进而说明这种细菌的作用是能够合成分解尿素的酶。在教学过程中，可以联系生产生活实际，使学生对尿素以及分解尿素的细菌形成一定的感性认识。同时通过课题背景的介绍，可以进行STS教育。对于实验中的对照原则，可以指导学生分组讨论，在掌握微生物分离技术的同时现固实验设计的基本原则。

八、资料袋

选择培养基

选择培养基的含义是:在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。

培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氨微生物，因为非固氮微生物不能在此培基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的徴生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变做生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。