课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数新颖的课程导入教案

专题2微生物的培养与应用

课题2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第一课时

一、教学目标：

1、利用选译培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数

2、分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性

3、形成无茵不在的概念，养成讲究卫生的习惯

二、教学重点：

对土样的选叹和选择培养基的配制

三、教学难点：

对分解尿素的细著的计数

四、教学准备：制作多媒体课件

五、教学方法：讲授法、小组合作探究法、自主学习法

六、教学过程：

教学内容

（一）引入新课

教师活动

学生活动

上节课我们学习了培养基的配置以回忆培养基的配置，思考如及接科技术。下面我们来学习如何进行何进行细菌的分离

细菌的分离，获得所需要的口的微生物。

介绍农业氮肥尿素的作用过程，以及细菌联系生活实例，了解尿在分解二尿素过程中的作用及原理

素的分解过程和原理，与实

际相结合，产生学习兴趣

CO(NH2)2+H2O

脲酶

CO2+2NH3

（一）筛选菌株

思考并回答：热泉水生耐热菌：Taq 70~80℃的高温条件淘汰了 分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

绝大多数微生物，使耐热的

问：为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来？

Taq细菌脱颖而出

展示P22的表格

小组内讨论：认真分析分离分解尿素的细菌所使用到的培养基的配方，思考并回答问题：

1、

培养基中使用到的碳源：葡萄糖和尿素

氮源：尿素

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（二）研究思路

（三）统计菌落数目

请根据这一思路，分析旁兰中本课题将用到的培养基配方，回答以下问题：

1.在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质? 2.绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。请你分析该培养基的配方，想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有是如何进行选择的? 在该培养基的配方中，葡萄糖是C源也是能源;尿素是培养基中的惟一氮源. 因此，原则上该培养基只有能够利用尿素的微生物才能够生长。具有选择作用,能够将利用尿素的微生物选择出来

两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为10的培养基中，得到以下两种统计结第二位同学的结果接近果。1.第一位同学在该浓度下涂布了一真实值。这两位同学的实个平板，统计的菌落数为230 验需要改进的操作是第一位同学需设置重复实2.第二位同学在该浓度下涂布了三个验组:第二位同学

统计平板，统计的菌的平命用为工25.我同学的三个菌落数相差太大，以这三个平板上菌落数的平均值163作说明操作有误，应重新实为统计结果。几学的实验需要改进吗?如验

果需要，如何改进？

问：想一想，如何根据平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

每亳升样品中的菌株数=

说明：

（1）间接计数中，恰当的稀释度是成功统计的菌落数目的关键（参见实验设计部分）；

（2）间接计数统计的菌落数往往比活细菌数目低。

1.想一想，如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？

思考问题

理解计数公式中的各种符号的含义，理解计算的方法

学会统计菌落数目的方法，能够在实际实验中应用

答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。

2、

根据耐热菌分离的实例尝试说明本实验的培养基的选择作用

思考并回答

理解选择培养基的原理及其在实验中的作用，了解本实验的原理：选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其它微生物生长的培养基.

思考并回答：

C×MV- 2 -

（四）实验设计

设置对照:对照实验是指除了被测条件(实验变量或自变量),其它条件(无关变量)完全相同的实验.分为:空白对照、条件对照、相互对照和标准对照等.

结合书本P23页，小字部分，问：你能通过设置对照，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素吗？

1.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右，再取样，将样品装（事先要灭菌）入准备好的信封中。

2.制备培养基

3.微生物的培养与观察

小组内讨论，

进行方案的设计

方案1:其他同学用A同学的土样进行实验。

方案2: A同学以不接所的培养基作为空白对照。

阅读书本，了解实验设计的流程，特别注意理解样品的稀释，是如何做的

思考问题

这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的

问：为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量

和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？如果不同，你打算选用多大的稀释范围？

4、微生物的培养与观察

七、板书设计：

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一．研究思路

选择培养

二．统计菌落数目

直接统计

间接统计

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三、设置对照

四、实验设计

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