复习与测试优秀教案案例

专题二：微生物的培养和应用

6.（2010年全国卷）下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

⑴某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、、Na2HPO4MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，碳源是

，氮源是 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，帮该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于 。 ⑵将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是 。实验室中，为了获得形态和生理特证一致的菌体，一般应在 期取体；在生产中，常收集培养至 期的细菌用于次生代谢产物的提取。

7.（周测四） (10分)同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。请分析回答问题：

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O 葡萄糖

1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g

尿素

琼脂

1.0 g 15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入______________指示剂，细菌合成的______________将尿素分解为________，pH升高，使指示剂变为红色。

(2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于______________培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的______________和____________，实验中需要振荡培养，原因是____________________________________。

(4)下图是利用____________________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在____________条件下进行。

(5)关于下图的操作方法和结果，叙述正确的是____________________。

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B．划线操作须在火焰上进行

C．在5区域中才可以提取到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

8.（周测一） (10分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。

(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。

(2)细菌鉴定:实验流程如图所示

①对配制的液体培养基等需采取

灭菌;实验所用液体培养基的碳源

为

(填“无机碳”或“有机碳”)。

②挑选可疑菌落制片后,用

观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后,35 ℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是

,对照组试管中应加入

,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比

对照组

(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。

④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应 。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有

。

(3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是

,获得图B效果的接种方法是

。

9.（11年）（15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于 培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

10.（2014）（15分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其

中葡萄糖苷酶可将 分解成 。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养（成分见下表）：

酵母膏

无机盐

+ + 淀粉

+ + 纤维素粉

琼脂

+ - - + CR溶液

+ + 水

+ + 培养基甲

+ 培养基乙

+ 注：“+”表示有，“-”表示无。

据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别

纤维素分解菌，原因是 。

11.（段考一） 自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对水体有一定的净化作用。请回答：

（1）培养硝化细菌时，将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是 。培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供 ，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于 培养基。

（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的 。若实验组每个平板中的菌落数都超过了300，应对样本菌液进行 处理。

（3）实验：探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小。

取含铵盐的液体培养基均分成 等分，其PH值可依次调节为 ，培养相同的时间后，可通过测定培养基中的 来判断硝化细菌分解能力的大小。

12.（2015） (15分)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 (填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。