复习与测试名师教学视频（文字实录）

专题二

微生物的分离、计数与筛选复习

【教材分析】

本节课内容是人教版选修一专题二第二、三课题的内容，本节课为复习课，教材主要介绍了两种微生物的分离方法及原理。该节内容是本专题甚至选修一的重点内容，同时也是高考中的高频考点，国考5年5考。

【学情分析】

对于本节课的内容学生已经初步了解了两种微生物分离的方法及原理，但是实际应用能力还是比较差，所以本节课需要提高学生的灵活应用能力。

【教学目标】

1、知识目标：分析分离尿素分解菌和纤维素分解菌的实验流程，并弄懂实验操作的原理

2、能力目标：（1）掌握从土壤中分离某种微生物的技术

（2）掌握活菌计数法和直接计数法的方法与区别

3、情感目标：领悟科学探究的方法，发展科学思维和创新能力。

【教学重难点】

教学重点：

1、分析分离尿素分解菌和纤维素分解菌的实验流程，并弄懂实验操作的原理

2、掌握活菌计数法和直接计数法的方法与区别

教学难点：

掌握从土壤中分离某种微生物的技术及应用

【教学过程】

一、双基梳理，学案检查

通过课下学生们自己填写学案来复习微生物的两种分离方法、原理及计数，课上来检查学生们的掌握情况。（学案附后）

二、小组讨论，比较总结

以小组为单位学生们总结归纳出两种微生物分解菌的分离原理、过程、鉴定的方法以及所使用的培养基，并派一名代表说明，最后师生总结如下：

尿素分解菌的分离

纤维素分解菌的分离

土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成脲酶，这

种物质把尿素分解成无机物的过原

程中起到筛选作用。

理

CO(NH2)2+H2O→

CO+2NH

23

脲酶

土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布于含刚果红(CR)的鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落→发酵培养

刚果红(产生透明圈) 选择培养基:液体、纤维素为唯一碳源

鉴别培养基:固体、加入刚果红

过

土壤取样→样品稀释→培养与观

程

察

鉴

酚红指示剂(变红) 定

培

选择培养基:固体、尿素为唯一氮养

源

基

三、知识排查，强化重点

通过对两种方法的比较总结可以看到尿素分解菌用到的是选择培养基而且是固体的，而纤维素分解菌用到的是选择培养基（液体）和鉴

别培养基（固体），下面我们来详细的区分2种培养基

知识点1、选择培养基与鉴别培养基

种类

制备方法

原理

依据某些微生

选择培

养基

培养基中加入

物质

物对某些物质或环境条

件的

或

而设计

鉴别培

养基

培养基中加

入

或

产生特定的

或其他变化

用途

从众多微生

物中分离所

需的微生物

举例

加入

分离得到酵母

菌和霉菌

用

培养基鉴别

大肠杆菌

鉴别不同种

类的微生物

能力跟进，高考对接

(2018.新课标全国卷Ⅰ.37) 将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题: （1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制 的生长，加入了链霉素的培养基属于 培养基。

（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源还有 (答出两点即可)。

氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有 (答出两点即可) （3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物。加入的显色剂是

，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 。 （4）甲乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果: •

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140、149，取平均值是133； •

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169、176，取平均值是124。 •

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是 •

。 通过对2种培养基的方法原理及用途的比较学生有了更深一步的认识，再通过今年高考题的练习，达到对这两种培养基的运用。

知识点2、微生物计数的两种方法

比较间接计数法

项目

(稀释涂布平板法)

原理

样品稀释足够高时，一个菌落来源于一个活菌。 直接计数法

(显微计数法)

利用特定的细菌（血细胞）计数板，在显微镜下计算 每毫升菌液所含菌株数

=每小格平均菌液数×400×10000×稀释倍数

不能区分死细胞和活细胞

比实际值偏高

每克样品中的菌株数

公式

=（C÷V）×M 稀释度不够时，当两个或多个细缺点

胞连在一起时，在培养基上观察到是一个菌落

结果

比实际值偏低

强化练习，巩固知识 1、同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL）（

）

A.2.34×108

B.2.34×109

C.234

D.23.4

2、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是

（

）

A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是

21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是

210、240和250，取平均值233

四、课堂小结，知识升华

【教学反思】

本节课为复习课，在学生已有的知识的基础上主要通过学生分组讨论总结知识点，通过小组讨论锻炼了学生的发散思维以及团队合作精神，同时使学生们对于微生物的分离方法及原理有了更深刻的认识，通过接触高考题使学生对于高考有了一个新的认识，不在惧怕；并且通过课上习题的练习使学生能灵活运用。培养学生举一反三，触类旁通，从事微生物学科学研究的基本素养。

附：学案

1．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

2．测定微生物数量的常用方法有 和 。一般来说，后者统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。 这是因为 。因此，

统计结果一般用 而不是活菌数来表示。

3．设置对照实验的主要目的是 ，

提高实验结果的可信度。

4.不同种类的微生物，往往需要不同的培养 和培养 。在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以 。

5．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，

其目的是 。

6．以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂，培养某种细菌后，若pH升高，指示剂 。

7．刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素

被 后，红色复合物无法形成，出现以 为

中心的 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

8.刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种

即 、 。

9.为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要

进行

实验，纤维素酶的发酵方法有

发酵和 发酵。

10.纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生

的 含量进行定量测定。